檢測(cè)轉(zhuǎn)化細(xì)胞增殖Z準(zhǔn)確可靠的方法

檢測(cè)DNA合成是目前檢測(cè)轉(zhuǎn)化細(xì)胞增殖zui準(zhǔn)確可靠的方法，目前常用的方法有如下幾種：
(1)3H-胸腺嘧啶核苷滲入法(3H-TdR)：胸腺嘧啶核苷(TdR)是DNA合成的前體物，處于S期的細(xì)胞不斷地?cái)z取TdR用以合成DNA。3H-TdR摻入法是將被放射性標(biāo)記的3H-TdR摻入DNA合成期的細(xì)胞，細(xì)胞內(nèi)3H-TdR摻入量的多少可客觀反映細(xì)胞復(fù)制DNA能力的大小，從而問接了解細(xì)胞增殖情況。通過檢測(cè)。H放射活性即可反映DNA含量。
1976年Mattem等首先采用此方法做體外藥敏試驗(yàn)。此后經(jīng)過長(zhǎng)期的廣泛研究，也己證實(shí)該法對(duì)各種動(dòng)物腫瘤及人類腫瘤均有較好的預(yù)測(cè)價(jià)值和重復(fù)性，主要用于細(xì)胞增殖的檢測(cè)與藥物敏感性試驗(yàn)等。但這種方法操作復(fù)雜，試劑含有同位素，具有放射性，對(duì)實(shí)驗(yàn)者有一定的危害，故限制了它的應(yīng)用。
(2)BrdU檢測(cè)法：BrdU中文全名為5-溴脫氧尿嘧啶核苷，為胸腺嘧啶的衍生物，可代替胸腺嘧啶在DNA合成期(S期)摻入，而后利用抗BrdU的抗體耦聯(lián)不同的酶，加入不同發(fā)光特性的底物，然后再通過比色法、化學(xué)發(fā)光檢測(cè)或熒光信號(hào)檢測(cè)底物強(qiáng)度等步驟，反映BrdU的摻入量。該方法不需要再和放射性物質(zhì)打交道。
(3)EdU檢測(cè)法：BrdU雖然解決了接觸同位素的問題，但該方法需要變性DNA后才能與抗體結(jié)合，但這就破壞了DNA雙鏈結(jié)構(gòu)，對(duì)某些后續(xù)或同時(shí)進(jìn)行的試驗(yàn)，如其他染料的結(jié)合染色有影響。現(xiàn)在有一種新的檢測(cè)方法能避免這種情況的發(fā)生——EdU檢測(cè)。EdU(5-乙炔基-2’脫氧尿嘧啶核苷)也是一種胸腺嘧啶核苷類似物，但其連有的炔羥基團(tuán)在天然化合物中很少見，在轉(zhuǎn)化細(xì)胞增殖時(shí)能夠插入正在復(fù)制的DNA分子中，基于EdU與染料的共軛反應(yīng)可以進(jìn)行快速的細(xì)胞增殖檢測(cè)分析，可以有效地檢測(cè)處于S期的細(xì)胞百分?jǐn)?shù)。與傳統(tǒng)的免疫熒光染色(BrdU)檢測(cè)方法相比，更簡(jiǎn)單，更快速，更準(zhǔn)確。
鑒別    含量：    進(jìn)口/國產(chǎn)    組氨酸    20mg/支    英文名稱    110890-200001    規(guī)格:
鑒別    含量：    進(jìn)口/國產(chǎn)    黃山藥皂苷提取物    20mg/支    英文名稱    110891-200001    規(guī)格:
含量測(cè)定    含量：    進(jìn)口/國產(chǎn)    積雪草苷    20mg/支    英文名稱    110892-200604    規(guī)格:
鑒別    含量：    進(jìn)口/國產(chǎn)    羥基積雪草苷    20mg/支    英文名稱    110893-200201    規(guī)格:
含量測(cè)定    含量：    進(jìn)口/國產(chǎn)    甜菜堿    20mg/支    英文名稱    110894-200503    規(guī)格:
含量測(cè)定    含量：    進(jìn)口/國產(chǎn)    雪上一枝蒿甲素    20mg/支    英文名稱    110895-200303    規(guī)格:
鑒別    含量：    進(jìn)口/國產(chǎn)    琥珀酸    20mg/支    英文名稱    110896-200001    規(guī)格:
含量測(cè)定    含量：    進(jìn)口/國產(chǎn)    α-蒎烯    20mg/支    英文名稱    110897-200001    規(guī)格:
含量測(cè)定    含量：    進(jìn)口/國產(chǎn)    γ-亞麻酸甲酯    20mg/支    英文名稱    110898-200503    規(guī)格:
轉(zhuǎn)化細(xì)胞