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腫瘤耐藥細(xì)胞株的生長(zhǎng)情況

閱讀:445          發(fā)布時(shí)間:2017-5-24

*、腫瘤耐藥細(xì)胞株的生長(zhǎng)情況
胚胎干細(xì)胞性很高,可以分化成各種細(xì)胞,細(xì)胞株能夠傳到40-50代,但遺傳物質(zhì)沒(méi)有發(fā)生改變。而細(xì)胞系是細(xì)胞傳至50代以后生存下來(lái),細(xì)胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變,并且?guī)в邪┳兊奶攸c(diǎn)。有可能在培養(yǎng)條件下無(wú)限增殖。安全性:所有腫瘤和病毒轉(zhuǎn)染的細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作,并請(qǐng)注意防護(hù),所有廢液及接觸過(guò)此細(xì)胞的器皿需高壓滅菌后方能丟棄。收到細(xì)胞后,在倒置鏡下觀察整個(gè)細(xì)胞生長(zhǎng)情況。
1.如果細(xì)胞未長(zhǎng)滿(mǎn),用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超菌臺(tái)內(nèi),嚴(yán)格無(wú)菌操作,打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶,吸出培養(yǎng)液,換 10ml新鮮培養(yǎng)液后繼續(xù)培養(yǎng)。
2.如果細(xì)胞已長(zhǎng)滿(mǎn),即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
 
第二、腫瘤耐藥細(xì)胞株的具體步驟如下:
1. 棄去培養(yǎng)液,用PBS洗1-2次。
2. 加1ml消化液于培養(yǎng)瓶中,倒放于37℃培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱,之后翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶10-30秒后,在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若干細(xì)胞大部分變圓,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量*培養(yǎng)基終止消化。
 
第三、腫瘤耐藥細(xì)胞株的注意事項(xiàng):
1.觀察細(xì)胞在低倍鏡下進(jìn)行,否則不能準(zhǔn)確判斷細(xì)胞的傳代密度??醇?xì)胞的形態(tài)請(qǐng)?jiān)?0X或20X物鏡下。
2.瓶中運(yùn)輸培養(yǎng)基不能重復(fù)再用,請(qǐng)換用加雙抗的新培養(yǎng)基,細(xì)胞凍存后,培養(yǎng)基中可不加任何抗生素。
3.有些干細(xì)胞貼壁不牢,如發(fā)現(xiàn)貼壁細(xì)胞有脫落,可離心吹打后接種到新瓶?jī)?nèi)。

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