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ATCC細胞購買后的操作準則
閱讀:351 發(fā)布時間:2017-8-14如果ATCC細胞是單層貼壁生長:
1.無菌操作,取出大約5至10ml的運輸培養(yǎng)基。運輸培養(yǎng)基可以保存在4℃?zhèn)溆谩?/p>
2.將培養(yǎng)瓶放在產(chǎn)品說明書中推薦的溫度和CO2濃度下培養(yǎng)(大多數(shù)細胞系為37℃與5%CO2)直到細胞可以傳代培養(yǎng)。
如果ATCC細胞不貼壁或是懸浮狀態(tài)生長:
1.在無菌條件下,將培養(yǎng)瓶的全部內(nèi)容物轉移到離心管中。
2.在125×g轉速下離心5~10 min。
3.取出大約10 ml運輸培養(yǎng)基的上清液,并重懸細胞。將取出的運輸培養(yǎng)基儲存在4℃?zhèn)溆谩?/p>
4.無菌條件下,轉移懸浮細胞到25 cm2或75 cm2的培養(yǎng)瓶中,培養(yǎng)瓶大小取決于細胞株(見產(chǎn)品說明書)。
5.按照產(chǎn)品說明書中推薦的溫度和CO2濃度培養(yǎng)細胞,直到細胞可以傳代培養(yǎng)。原代細胞來源于一塊碎的或酶消化的組織。原代培養(yǎng)物,是多種類型細胞的混合物,保留了其來源組織的特點。
一段時間后,原代培養(yǎng)的細胞會達到融合狀態(tài),即在培養(yǎng)瓶中的所有可用空間由于細胞擴增都被覆蓋。在此之后,細胞需要消化(通常用蛋白水解酶,如胰蛋白酶)為單個細胞并且傳代(分裂,傳代或轉移)。在*次傳代以后,培養(yǎng)物通常被稱為一個細胞系。
每一次傳代培養(yǎng),細胞群體由于快速生長的細胞占主導地位而變得更均勻。具有所需特性的細胞也可以通過克隆,從培養(yǎng)物中選出。二倍體細胞很少可以倍增超過幾代。它們只有有限的復制能力,并且在細胞倍增20至80次后開始減緩并zui終停止分裂。
zui近的證據(jù)表明,某些細胞中觀察到的ATCC細胞衰老與預計的復制性衰老不同,可能是由于不適當?shù)呐囵B(yǎng)條件導致的。還有其他數(shù)據(jù)顯示,對某些物種的細胞系(尤其是人源的)即使生長在改進的培養(yǎng)條件下仍存在復制衰老。這種衰老是由細胞分裂時染色體末端(端粒)縮短調控的。
常溫,避光 含量測定 *: 雙香豆素 規(guī)格: 100mg
常溫,避光 TLC法檢查用 *: 雙氰胺 規(guī)格: 50mg
常溫,避光 含量測定 *: 水楊酸鎂 規(guī)格: 50mg
常溫,避光 含量測定 *: 司坦唑醇 規(guī)格: 100mg
常溫,避光 含量測定 *: 苯妥英鈉 規(guī)格: 50mg
ATCC細胞