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干細胞鑒定法之成骨誘導分化

閱讀:97          發(fā)布時間:2017-10-27

干細胞鑒定法之成骨誘導分化
茜素紅染色方法和原理:茜素紅又名茜素磺酸鈉,茜素S,茜素紅S,茜素胭脂紅,1,2-二羥基蒽醌-3-磺酸鈉,1,2-二羥基蒽醌-3-磺酸鈉鹽。橙黃色或黃棕色粉末。易溶于水,微溶于乙醇,不溶于苯。1%水溶液pH 為2.15,其水溶液呈淺黃褐色,加鹽酸后變成黃色,加氫氧化鈉后則變成藍紫色。有刺激性。能與許多金屬離子生成帶色化合物,能與鋯、釷、鋁、鈦及鈹和鈣的顯色反應。染色的原理就是茜素紅和鈣發(fā)生顯色反應,產(chǎn)生一種深紅色的帶色化合物,這樣成骨誘導的細胞外面沉積的鈣結節(jié)也就被染成了深紅色。

成骨誘導的過程是使鈣離子能夠以鈣鹽的方式沉淀下來,這就是我們常說的“鈣結節(jié)”。鑒定鈣結節(jié)的染色方法常用“茜素紅”。

步驟:
(1)吸去誘導液,再PBS 洗一到兩次;
(2)加入10%中性甲醛,固定30min-60min;
(3)吸去固定液,加入0.1%的茜素紅染色液,染色6-10min;
(4)用PBS 洗兩次,去處殘留的染色液;
(5)干細胞加入PBS,完成染色。
500G    十八水硫酸鋁        ALUMINUM SULFATE OCTADECAHYDRATE        KIT        7411-49-6
4L    鞘液,無防腐劑,8X        SHEATH SOLUTION, PRESERV-FREE, 8X        64285-73-0
4L    鞘液,含防腐劑,8X        SHEATH SOLUTION WITH PRESERV, 8X        
5kg                               尿素        UREA        
100 KG    磷酸鈉        SODIUM PHOSPHATE MONO DIHYDRAT        64285-73-0
12KG    磷酸鈉        SODIUM PHOSPHATE MONO DIHYDRAT        533-67-5
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