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腫瘤細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞活力檢測需滿足的條件是什么?
閱讀:121 發(fā)布時間:2017-11-8腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞膜是完整的
Propidium iodide(PI碘化丙啶)是一種核酸染料,常用于細(xì)胞凋亡(apoptosis)或細(xì)胞壞死(necrosis)的檢測和流式細(xì)胞儀分析。PI不能通過正常完整的細(xì)胞膜,故細(xì)胞在處于壞死或晚期凋亡時細(xì)胞膜被破壞,這時可為PI著紅色,可以用來分辨壞死細(xì)胞/正常細(xì)胞。
加入另一種可以透過細(xì)胞膜的核酸染料,就可以通過兩種染料將活細(xì)胞和死細(xì)胞區(qū)分開
PI經(jīng)常被用來與Calcein-AM或者FDA等熒光探針一起使用,能同時對活細(xì)胞和死細(xì)胞染色。PI-DNA復(fù)合物的激發(fā)和發(fā)射波長分別為535 nm和615 nm。
納米藥物的研究是近年來新藥的熱點。納米藥物載體篩選的首要標(biāo)準(zhǔn)是檢測其對細(xì)胞的毒性。而在細(xì)胞毒性測試中,首先要排除的是基底培養(yǎng)過程中產(chǎn)生的死細(xì)胞,即“噪音信號”。在對新型納米藥物載體SEONLA的研究中,研究者認(rèn)為只有活細(xì)胞比例超過90%方可進(jìn)行細(xì)胞毒性研究,細(xì)胞質(zhì)控的重要性由此可見一斑。
細(xì)胞毒性的入門級指標(biāo)是細(xì)胞活力。判斷一種物質(zhì)(化合物、小分子藥物或蛋白質(zhì)等)對細(xì)胞的毒性首先要觀察的是其是否或誘導(dǎo)細(xì)胞死亡,即細(xì)胞活力的變化。以維生素C為例,研究發(fā)現(xiàn),高濃度維生素C對眼癌細(xì)胞Y79 Retinoblastoma Cells具有殺傷作用。
以眼癌常用化療藥Melphalan作為對照,對經(jīng)過處理的細(xì)胞活性進(jìn)行檢測,發(fā)現(xiàn),隨著濃度的升高,維生素C對Y79 Retinoblastoma Cells殺傷作用逐漸增強(qiáng),并且維生素C對眼癌細(xì)胞的殺傷作用優(yōu)于Melphalan。這一實驗結(jié)果為眼癌更安全、更有效的治療方案的提出提供了理論依據(jù)。
除了細(xì)胞毒性研究,腫瘤細(xì)胞質(zhì)控在病毒感染或者RNA轉(zhuǎn)染的研究中也是非常重要的。在這一類研究中,轉(zhuǎn)染/感染試劑或多或少都會對細(xì)胞已有一定殺傷作用。
因此,在轉(zhuǎn)染之前,活細(xì)胞需要達(dá)到一定的比例才可以保證在轉(zhuǎn)染之后有足夠數(shù)量的細(xì)胞進(jìn)行后續(xù)的研究。而這一比例需要實驗條件摸索才能確定。
英文縮寫: 活化半胱胺酸蛋白酶蛋白3抗體 caspase-3 p12 subunit
英文縮寫: 7號染色體開放閱讀框61抗體 C7ORF61
英文縮寫: 少突膠質(zhì)細(xì)胞跨膜蛋白抗體 Claudin 11
英文縮寫: 刺激分子B7-1蛋白抗體 CD80
英文縮寫: 末端補(bǔ)體復(fù)合物抗體 C5b-9
英文縮寫: 8號染色體開放閱讀框55抗體 C8orf55
英文縮寫: 補(bǔ)體C4a+C4b蛋白抗體 C4a+C4b
英文縮寫: CD44V7抗體 CD44v7
英文縮寫: CD44V10抗體 CD44v10
英文縮寫: CD44V4抗體 CD44v4
英文縮寫: 緊密連接蛋白4抗體 Claudin 4
英文縮寫: 6號染色體開放閱讀框140抗體 C6orf140
英文縮寫: L型鈣通道蛋白抗體 CACH2
英文縮寫: 電壓依賴性鈣通道Cav3.1抗體 CACNA1G
腫瘤細(xì)胞