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腫瘤細胞進行細胞活力檢測需滿足的條件是什么?

時間:2017-11-8閱讀:140
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腫瘤細胞的細胞膜是完整的
       Propidium iodide(PI碘化丙啶)是一種核酸染料,常用于細胞凋亡(apoptosis)或細胞壞死(necrosis)的檢測和流式細胞儀分析。PI不能通過正常完整的細胞膜,故細胞在處于壞死或晚期凋亡時細胞膜被破壞,這時可為PI著紅色,可以用來分辨壞死細胞/正常細胞。
       加入另一種可以透過細胞膜的核酸染料,就可以通過兩種染料將活細胞和死細胞區(qū)分開
       PI經(jīng)常被用來與Calcein-AM或者FDA等熒光探針一起使用,能同時對活細胞和死細胞染色。PI-DNA復合物的激發(fā)和發(fā)射波長分別為535 nm和615 nm。
       納米藥物的研究是近年來新藥的熱點。納米藥物載體篩選的首要標準是檢測其對細胞的毒性。而在細胞毒性測試中,首先要排除的是基底培養(yǎng)過程中產(chǎn)生的死細胞,即“噪音信號”。在對新型納米藥物載體SEONLA的研究中,研究者認為只有活細胞比例超過90%方可進行細胞毒性研究,細胞質控的重要性由此可見一斑。
       細胞毒性的入門級指標是細胞活力。判斷一種物質(化合物、小分子藥物或蛋白質等)對細胞的毒性首先要觀察的是其是否或誘導細胞死亡,即細胞活力的變化。以維生素C為例,研究發(fā)現(xiàn),高濃度維生素C對眼癌細胞Y79 Retinoblastoma Cells具有殺傷作用。
       以眼癌常用化療藥Melphalan作為對照,對經(jīng)過處理的細胞活性進行檢測,發(fā)現(xiàn),隨著濃度的升高,維生素C對Y79 Retinoblastoma Cells殺傷作用逐漸增強,并且維生素C對眼癌細胞的殺傷作用優(yōu)于Melphalan。這一實驗結果為眼癌更安全、更有效的治療方案的提出提供了理論依據(jù)。
       除了細胞毒性研究,腫瘤細胞質控在病毒感染或者RNA轉染的研究中也是非常重要的。在這一類研究中,轉染/感染試劑或多或少都會對細胞已有一定殺傷作用。
       因此,在轉染之前,活細胞需要達到一定的比例才可以保證在轉染之后有足夠數(shù)量的細胞進行后續(xù)的研究。而這一比例需要實驗條件摸索才能確定。
英文縮寫:    活化半胱胺酸蛋白酶蛋白3抗體    caspase-3 p12 subunit
英文縮寫:    7號染色體開放閱讀框61抗體    C7ORF61
英文縮寫:    少突膠質細胞跨膜蛋白抗體    Claudin 11
英文縮寫:    刺激分子B7-1蛋白抗體    CD80
英文縮寫:    末端補體復合物抗體    C5b-9
英文縮寫:    8號染色體開放閱讀框55抗體    C8orf55
英文縮寫:    補體C4a+C4b蛋白抗體    C4a+C4b
英文縮寫:    CD44V7抗體    CD44v7
英文縮寫:    CD44V10抗體    CD44v10
英文縮寫:    CD44V4抗體    CD44v4
英文縮寫:    緊密連接蛋白4抗體    Claudin 4
英文縮寫:    6號染色體開放閱讀框140抗體    C6orf140
英文縮寫:    L型鈣通道蛋白抗體    CACH2
英文縮寫:    電壓依賴性鈣通道Cav3.1抗體    CACNA1G
腫瘤細胞

 

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