SV-40轉(zhuǎn)化肺成纖維細(xì)胞；WI38/VA13說明書

SV-40轉(zhuǎn)化肺成纖維細(xì)胞；WI38/VA13說明書采用干冰保存運(yùn)輸。收到細(xì)胞時(shí)，若干冰已經(jīng)*融化，請(qǐng)立即將細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng)；若尚留有干冰，請(qǐng)立即將細(xì)胞放入液氮中保存待用，請(qǐng)按條件貯存細(xì)胞，切不可將細(xì)胞置于高溫環(huán)境。

SV-40轉(zhuǎn)化肺成纖維細(xì)胞；WI38/VA13說明書現(xiàn)貨直銷，免費(fèi)快遞送貨上門。公司供應(yīng)各種細(xì)胞株，細(xì)胞系，種類齊全，現(xiàn)貨，質(zhì)量保證，公司所有產(chǎn)品僅供科研使用，不得用于醫(yī)學(xué)診斷。使用前仔細(xì)閱讀本說明書。

產(chǎn)品名稱	SV-40轉(zhuǎn)化肺成纖維細(xì)胞；WI38/VA13說明書
用途	僅用科研
保存條件	4℃保存一年;-20℃長(zhǎng)期保存

細(xì)胞名稱
形態(tài)特性  上皮細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性  該細(xì)胞1964年建系，源自3個(gè)月胎齡的女性胚胎的肺成纖維細(xì)胞，經(jīng)SV-40轉(zhuǎn)化。 
培養(yǎng)條件  MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS
傳代方法  1:2～1:10傳代，每周換液2次
傳代情況 C2
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法（-）
STR 
同工酶 
染色體  45～89
使用權(quán)限 A類
運(yùn)輸保存：
采用干冰保存運(yùn)輸。收到細(xì)胞時(shí)，若干冰已經(jīng)*融化，請(qǐng)立即將細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng)；若尚留有干冰，請(qǐng)立即將細(xì)胞放入液氮中保存待用，請(qǐng)按條件貯存細(xì)胞，切不可將細(xì)胞置于高溫環(huán)境。
保存條件：4℃保存一年;-20℃長(zhǎng)期保存
用途：只可用于科研。
儲(chǔ)存：液氮。
運(yùn)輸：干冰(第二代培養(yǎng)末期液氮凍存)。
細(xì)胞一般2-3天更換一次培養(yǎng)基，這取決于細(xì)胞生長(zhǎng)的速度。許多細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室通常在周一，周三，周五更換培養(yǎng)基。
注意：*次植入后，在6-16小時(shí)內(nèi)更換培養(yǎng)基，以去除殘留的二甲基亞楓和死亡細(xì)胞。到達(dá)客戶手中，出現(xiàn)任何問題（人為或者非人為），導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。對(duì)于細(xì)胞的真實(shí)性，支持客戶檢測(cè)對(duì)應(yīng)的biomarker，（如證明細(xì)胞錯(cuò)誤，全額退款。）公司針對(duì)每株細(xì)胞，鑒定gene background，鑒定完成的細(xì)胞可以提供數(shù)據(jù)，用于證明細(xì)胞的真實(shí)性，并且?guī)椭蛻舾嗟牧私饧?xì)胞特性。
操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中，將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片，待細(xì)胞長(zhǎng)至80%時(shí)取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對(duì)應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽(yáng)性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍(lán)。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。2,4- 二氯苯氧乙酸    5g
2,5- 二苯基惡唑    5g
2,6- 二氯酚靛酚鈉    1g
2.0 mL RNase-free 離心管    500 支
200 μL RNase-free 黃吸頭 ( 袋裝 )    1000 支
200 μL RNase-free 黃吸頭 ( 袋裝帶芯 )    1000 支
200 μL RNase-free 黃吸頭 ( 盒裝 )    96 支
200 μL RNase-free 黃吸頭 ( 盒裝已滅菌 )    1000 支
200μLRNase-free 黃吸頭 ( 盒裝已滅菌帶芯 )    96 支
3- 氨基 -9- 乙基咔唑    5g
3- 苯甲酰丙酸    5g
3- 三 ( 羥甲基 ) 甲基 -3- 氨基丙烷磺酸    10g
3- 異丁基 -1- 甲基黃嘌呤    250g
3-( 環(huán)己胺 )-1- 丙磺酸    10g
3-(3,4- 二羥基苯 )-L- 丙氨酸    5g
3,3’- 二氨基聯(lián)苯胺四鹽酸    1g
3,3’,5,5’- 四甲基聯(lián)苯胺二鹽酸    1g
3,5 二硝基水楊酸    25g
3′-O-Me-m7G(5′)ppp(5′)G 帽結(jié)構(gòu)類似物    25 OD
3'-RACE 試劑盒    10 次
4- 氨基 -N,N- 二甲基鹽酸鹽    5g
4- 甲基傘形酮    10g
4- 甲基傘形酮 -β-D- 葡糖苷酸    100mg
4- 氯 -1- 萘酚    5g
4% 多聚甲醛    250 mL
4% 多聚甲醛 (RNA )    250 mL
4’,6- 二脒基 -2- 苯基吲哚二鹽酸鹽    10mgOU749 （1 mg）N-[5-[（4-methoxyphenyl）methyl]-1，3，4-thiadiazol-2-yl]-benzenesulfonamide； OU749
19（R）-hydroxy Prostaglandin E1 （500 ug）9-oxo-11。alpha。，15S，19R-trihydroxy-prost-13E-en-1-oic acid； 19（R）-hydroxy PGE1； 19（R）-hydroxy Prostaglandin E1
Iberin （5 mg）1-isothiocyanato-3-（methylsulfinyl）-propane； NSC 321801； Iberin
Sulprostone （5 mg）N-（methylsulfonyl）-9-oxo-11。alpha。，15R-dihydroxy-16-phenoxy-17，18，19，20-tetranor-prosta-5Z，13E-dien-1-amide； Sulprostone
13，14-dihydro-15-keto Prostaglandin F1α （10 mg）9。alpha。，11。alpha。-dihydroxy-15-oxo-prostan-1-oic acid； 13，14-dihydro-15-keto PGF1α； 13，14-dihydro-15-keto Prostaglandin F1α
5-trans Prostaglandin F2β （1 mg）9β，11α，15S-trihydroxy-prosta-5E，13E-dien-1-oic acid； 5，6-trans PGF2β|5-trans-9β-Prostaglandin F2α； 5-trans Prostaglandin F2β
13，14-dihydro-15-keto Prostaglandin F2α isopropyl ester （50 mg）9。alpha。，11。alpha。-dihydroxy-15-oxo-prost-5Z-en-1-oic acid， isopropyl ester； 13，14-dihydro-15-keto PGF2α isopropyl ester； 13，14-dihydro-15-keto Prostaglandin F2α isopropyl ester
15（S）-Fluprostenol isopropyl ester （1 mg）9。alpha。，11。alpha。，15S-trihydroxy-16-（3-（trifluoromethyl）phenoxy）-17，18，19，20-tetranor-prosta-5Z，13E-dien-1-oic acid， isopropyl ester； 15（S）-Flu-Ipr； 15（S）-Fluprostenol isopropyl ester
15（R），19（R）-hydroxy Prostaglandin F2α （500 ug）9α，11α，15R，19R-tetrahydroxy-prosta-5Z，13E-dien-1-oic acid； 15（R），19（R）-hydroxy PGF2α； 15（R），19（R）-hydroxy Prostaglandin F2α
Prostaglandin J2 （5 mg）11-oxo-15S-hydroxy-prosta-5Z，9，13E-trien-1-oic acid； PGJ2； Prostaglandin J2
Leukotriene B4 Ethanolamide （50 ug）N-（2-hydroxyethyl）-5S，12R-dihydroxy-6Z，8E，10E，14Z-eicosatetraenamide； LTB4-EA； Leukotriene B4 Ethanolamide
12（S）-hydroxy-16-Heptadecynoic Acid （10 mg）12S-hydroxy-16-heptadecynoic acid； 12（S）-hydroxy-16-Heptadecynoic Acid
9（S）-HODE-d4 （50 ug）9S-hydroxy-10E，12Z-octadecadienoic-9，10，12，13-d4 acid； 9（S）-HODE-d4
8（S），15（S）-DiHETE （50 ug）8S，15S-dihydroxy-5Z，9E，11Z，13E-eicosatetraenoic acid； 8（S），15（S）-DiHETE
Arachidonic Acid methyl ester-d8 （1 mg）5Z，8Z，11Z，14Z-eicosatetraenoic-5，6，8，9，11，12，14，15-d8 acid， methyl ester； Methyl Arachidonate-d8； Arachidonic Acid methyl ester-d8
8-Isoprostane Affinity Column （20 ml） （1 ea）8-epi Prostaglandin F2α|8-iso Prostaglandin F2α； 8-Isoprostane Affinity Column （20 ml）