人臍靜脈細(xì)胞融合細(xì)胞；EA.hy926說(shuō)明書

人臍靜脈細(xì)胞融合細(xì)胞；EA.hy926說(shuō)明書采用干冰保存運(yùn)輸。收到細(xì)胞時(shí)，若干冰已經(jīng)*融化，請(qǐng)立即將細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng)；若尚留有干冰，請(qǐng)立即將細(xì)胞放入液氮中保存待用，請(qǐng)按條件貯存細(xì)胞，切不可將細(xì)胞置于高溫環(huán)境。

人臍靜脈細(xì)胞融合細(xì)胞；EA.hy926說(shuō)明書現(xiàn)貨直銷，免費(fèi)快遞送貨上門。公司供應(yīng)各種細(xì)胞株，細(xì)胞系，種類齊全，現(xiàn)貨，質(zhì)量保證，公司所有產(chǎn)品僅供科研使用，不得用于醫(yī)學(xué)診斷。使用前仔細(xì)閱讀本說(shuō)明書。

產(chǎn)品名稱	人臍靜脈細(xì)胞融合細(xì)胞；EA.hy926說(shuō)明書
用途	僅用科研
保存條件	4℃保存一年;-20℃長(zhǎng)期保存

細(xì)胞名稱
形態(tài)特性  內(nèi)皮細(xì)胞
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性  在PEG脅迫下，將原代培養(yǎng)的人臍靜脈細(xì)胞與抗硫鳥嘌呤的A549克隆株融合，構(gòu)建了人臍靜脈細(xì)胞株, EA.hy926。 融合子在HAT培養(yǎng)基上生長(zhǎng)并以八因子相關(guān)抗原篩選。 EA.hy926已經(jīng)過(guò)100次以上的群體倍增(PDLs)。 電鏡照片顯示W(wǎng)eibel-Palade小體的細(xì)胞質(zhì)分布以及組織特異性的細(xì)胞器，分化的內(nèi)皮細(xì)胞特性如血管生成，體內(nèi)平衡/血栓形成，血壓及炎癥反應(yīng)。 [PubMed: 6407019] [PubMed: 2079463] 
培養(yǎng)條件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%
傳代方法  消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長(zhǎng)滿。
傳代情況 PN5
凍存條件  *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測(cè) 陰性
STR 
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 A類
運(yùn)輸保存：
采用干冰保存運(yùn)輸。收到細(xì)胞時(shí)，若干冰已經(jīng)*融化，請(qǐng)立即將細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng)；若尚留有干冰，請(qǐng)立即將細(xì)胞放入液氮中保存待用，請(qǐng)按條件貯存細(xì)胞，切不可將細(xì)胞置于高溫環(huán)境。
保存條件：4℃保存一年;-20℃長(zhǎng)期保存
用途：只可用于科研。
儲(chǔ)存：液氮。
運(yùn)輸：干冰(第二代培養(yǎng)末期液氮凍存)。
細(xì)胞一般2-3天更換一次培養(yǎng)基，這取決于細(xì)胞生長(zhǎng)的速度。許多細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室通常在周一，周三，周五更換培養(yǎng)基。
注意：*次植入后，在6-16小時(shí)內(nèi)更換培養(yǎng)基，以去除殘留的二甲基亞楓和死亡細(xì)胞。到達(dá)客戶手中，出現(xiàn)任何問(wèn)題（人為或者非人為），導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。對(duì)于細(xì)胞的真實(shí)性，支持客戶檢測(cè)對(duì)應(yīng)的biomarker，（如證明細(xì)胞錯(cuò)誤，全額退款。）公司針對(duì)每株細(xì)胞，鑒定gene background，鑒定完成的細(xì)胞可以提供數(shù)據(jù)，用于證明細(xì)胞的真實(shí)性，并且?guī)椭蛻舾嗟牧私饧?xì)胞特性。
操作步驟：
1. 將無(wú)菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中，將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片，待細(xì)胞長(zhǎng)至80%時(shí)取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過(guò)氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育：按照抗體說(shuō)明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對(duì)應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽(yáng)性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍(lán)。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。動(dòng)植物膜蛋白微量制備試劑盒    50 次
動(dòng)植物總蛋白微量提取試劑盒    50 次
杜氏 PBS 緩沖液 ,10×    100mL
端粒酶重復(fù)片段擴(kuò)增試劑盒 (TRAP)    50 次
對(duì)氨基苯磺酸    25g
對(duì)苯醌固定液    250 mL
對(duì)硝基苯 -β-D- 吡喃半乳糖苷    1g
對(duì)硝基苯磷酸二鈉鹽    1g
多點(diǎn)突變?cè)噭┖?nbsp;   20 次
多酚氧化酶 ( 菌菇 )    25KU
多核苷酸磷酸化酶    100mg
多聚 -L- 賴氨酸 (15-30 萬(wàn) )    25mg
多聚 -L- 賴氨酸 (3-7 萬(wàn) )    25mg
多聚 -L- 賴氨酸 (7-15 萬(wàn) )    25mg
多聚半乳糖醛酸鈉鹽    1g16，16-dimethyl-6-keto Prostaglandin E1 （100 mg）6，9-dioxo-11。alpha。，15R-dihydroxy-16，16-dimethyl-prost-13E-en-1-oic acid； 16，16-dimethyl-6-keto PGE1； 16，16-dimethyl-6-keto Prostaglandin E1
19（R）-hydroxy Prostaglandin E1 （50 ug）9-oxo-11。alpha。，15S，19R-trihydroxy-prost-13E-en-1-oic acid； 19（R）-hydroxy PGE1； 19（R）-hydroxy Prostaglandin E1
Iberin （1 mg）1-isothiocyanato-3-（methylsulfinyl）-propane； NSC 321801； Iberin
Sulprostone （1 mg）N-（methylsulfonyl）-9-oxo-11。alpha。，15R-dihydroxy-16-phenoxy-17，18，19，20-tetranor-prosta-5Z，13E-dien-1-amide； Sulprostone
13，14-dihydro-15-keto Prostaglandin F1α （500 ug）9。alpha。，11。alpha。-dihydroxy-15-oxo-prostan-1-oic acid； 13，14-dihydro-15-keto PGF1α； 13，14-dihydro-15-keto Prostaglandin F1α
iPF2α-IV （50 ug）5（S），9。alpha。，11。alpha。-trihydroxy-1。alpha。，1。beta。，1。gamma。-trihomo-18，19，20-trinor-8。beta。-prosta-2Z，6E-dien-1-oic acid； iPF2α-IV
13，14-dihydro-15-keto Prostaglandin F2α isopropyl ester （10 mg）9。alpha。，11。alpha。-dihydroxy-15-oxo-prost-5Z-en-1-oic acid， isopropyl ester； 13，14-dihydro-15-keto PGF2α isopropyl ester； 13，14-dihydro-15-keto Prostaglandin F2α isopropyl ester
15（S）-Fluprostenol （100 mg）9α，11α，15S-trihydroxy-16-（3-（trifluoromethyl）phenoxy）-17，18，19，20-tetranor-prosta-5Z，13E-dien-1-oic acid； 15（S）-Fluprostenol
15（R），19（R）-hydroxy Prostaglandin F2α （50 ug）9α，11α，15R，19R-tetrahydroxy-prosta-5Z，13E-dien-1-oic acid； 15（R），19（R）-hydroxy PGF2α； 15（R），19（R）-hydroxy Prostaglandin F2α
Prostaglandin J2 （1 mg）11-oxo-15S-hydroxy-prosta-5Z，9，13E-trien-1-oic acid； PGJ2； Prostaglandin J2
Leukotriene B4 （25 ug）5S，12R-dihydroxy-6Z，8E，10E，14Z-eicosatetraenoic acid； LTB4； Leukotriene B4
6-keto Prostaglandin F1α-d4 （1 mg）6-oxo-9α，11α，15S-trihydroxy-prost-13E-en-1-oic-3，3，4，4-d4 acid； 6-keto PGF1α-d4； 6-keto Prostaglandin F1α-d4
多聚甲醛    25g
多聚甲醛 - 磷酸緩沖固定液    250 mL
多聚甲醛 - 氫氧固定液    250 mL
多粘菌素 B 硫酸鹽    5mL