詳細(xì)介紹
人視網(wǎng)膜上皮細(xì)胞;APRE-19*操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中,將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細(xì)胞爬片,待細(xì)胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應(yīng)的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染:用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側(cè),再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),以免產(chǎn)生氣泡,封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
人視網(wǎng)膜上皮細(xì)胞;APRE-19*現(xiàn)貨直銷,免費快遞送貨上門。公司供應(yīng)各種細(xì)胞株,細(xì)胞系,種類齊全,現(xiàn)貨,質(zhì)量保證,公司所有產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于醫(yī)學(xué)診斷。使用前仔細(xì)閱讀本說明書。
產(chǎn)品名稱 | |
用途 | 僅用科研 |
保存條件 | 4℃保存一年;-20℃長期保存 |
細(xì)胞名稱
形態(tài)特性 上皮細(xì)胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細(xì)胞系源自于一名19歲車禍罹難的健康男性的視網(wǎng)膜組織,由Amy Aotaki-Keen建系于1986年。該細(xì)胞系表達視網(wǎng)膜色素細(xì)胞*的分子標(biāo)記如胞內(nèi)視黃醛結(jié)合蛋白和PRE-65。
培養(yǎng)條件 DMEM/F12(1:1): Ham's F12/DME Medium (DME H-16/F-12 50% Mixture w/o HEPES, with NEAA Medium) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C6
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶 同工酶鑒定
染色體
使用權(quán)限 A類
運輸保存:
采用干冰保存運輸。收到細(xì)胞時,若干冰已經(jīng)*融化,請立即將細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng);若尚留有干冰,請立即將細(xì)胞放入液氮中保存待用,請按條件貯存細(xì)胞,切不可將細(xì)胞置于高溫環(huán)境。
保存條件:4℃保存一年;-20℃長期保存
用途:只可用于科研。
儲存:液氮。
運輸:干冰(第二代培養(yǎng)末期液氮凍存)。
細(xì)胞一般2-3天更換一次培養(yǎng)基,這取決于細(xì)胞生長的速度。許多細(xì)胞培養(yǎng)實驗室通常在周一,周三,周五更換培養(yǎng)基。
注意:*次植入后,在6-16小時內(nèi)更換培養(yǎng)基,以去除殘留的二甲基亞楓和死亡細(xì)胞。到達客戶手中,出現(xiàn)任何問題(人為或者非人為),導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。對于細(xì)胞的真實性,支持客戶檢測對應(yīng)的biomarker,(如證明細(xì)胞錯誤,全額退款。)公司針對每株細(xì)胞,鑒定gene background,鑒定完成的細(xì)胞可以提供數(shù)據(jù),用于證明細(xì)胞的真實性,并且?guī)椭蛻舾嗟牧私饧?xì)胞特性。
堿性磷酸酶標(biāo)記親和素 100mg
堿性磷酸酶測試劑盒 48 T
堿性磷酸酶測試劑盒 48 T
堿性品紅 5g
健那綠 B 1g
交聯(lián)瓊脂糖凝膠 2B 100mL
交聯(lián)瓊脂糖凝膠 4B 100mL
交聯(lián)瓊脂糖凝膠 6B 100mL
膠回收及 PCR 片段純化兩用試劑盒 100 次
膠回收及 PCR 片段純化兩用試劑盒 50 次
膠原蛋白Ⅰ型 1g
膠原酶Ⅰ型 100mg
膠原酶Ⅱ型 100mg
膠原酶Ⅲ型 100mg
膠原酶Ⅳ型 100mg
焦碳酸二乙酯 10mL
角膜上皮細(xì)胞生長因子 5mL
角質(zhì)細(xì)胞生長因子 5mL
角質(zhì)細(xì)胞生長因子 - 不含 BPE 5mL
角質(zhì)細(xì)胞生長因子 - 不含動物成分 5mLPP2 (1 mg)3-(4-chlorophenyl)-1-(1,1-dimethylethyl)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-4-amine; AGL 1879; PP2
Sphingosine-1-Phosphate Lyase Fluorogenic Substrate (10 mg)2S-ammonio-3R-hydroxy-5-((2-oxo-2H-chromen-7-yl)oxy)pentyl hydrogen phosphate; S1P Lyase Fluorogenic Substrate; Sphingosine-1-Phosphate Lyase Fluorogenic Substrate
CB-86 (1 mg)N-cyclopropyl-8-[3-(1,1-dimethylheptyl)-5-hydroxyphenoxy]-oct*; CB-86
Iso-Olomoucine (10 mg)2-[[7-methyl-6-[(phenylmethyl)amino]-7H-purin-2-yl]amino]-ethanol; Iso-Olomoucine
tetranor-PGJM (100 ug)8-((1R,2S)-2-(2-carboxyethyl)-5-oxocyclopent-3-en-1-yl)-6-oxooctanoic acid; tetranor-PGJ Metabolite; tetranor-PGJM
(+)-Warfarin (25 mg)4-hydroxy-3-[(1R)-3-oxo-1-phenylbutyl]-2H-1-benzopyran-2-one; (R)-Warfarin; (+)-Warfarin
(S)-Lisofylline (10 mg)3,7-dihydro-1-[5S-hydroxyhexyl]-3,7-dimethyl-1H-purine-2,6-dione; (+)-Lisofylline|(S)-LSF; (S)-Lisofylline
IWR-1-endo (25 mg)4-[(3aR,4S,7R,7aS)-1,3,3a,4,7,7a-hexahydro-1,3-dioxo-4,7-methano-2H-isoindol-2-yl]-N-8-quinolinyl-benzamide; IWR-1-endo
16,16-dimethyl-6-keto Prostaglandin E1 (10 mg)6,9-dioxo-11。alpha。,15R-dihydroxy-16,16-dimethyl-prost-13E-en-1-oic acid; 16,16-dimethyl-6-keto PGE1; 16,16-dimethyl-6-keto Prostaglandin E1
JWH 071 (5 mg)(1-ethyl-1H-indol-3-yl)-1-naphthalenyl-methanone; JWH 071
Kahweol (5 mg)3bS,4,5,6,7R,8R,9,10,10aR,10bS-decahydro-7-hydroxy-10b-methyl-5aS,8-methano-5aH-cyclohepta[5,6]naphtho[2,1-b]furan-7-methanol; Kahweol
Sulprostone (500 ug)N-(methylsulfonyl)-9-oxo-11。alpha。,15R-dihydroxy-16-phenoxy-17,18,19,20-tetranor-prosta-5Z,13E-dien-1-amide; Sulprostone