人胚胎心臟成纖維樣細胞；HEH2價格

人胚胎心臟成纖維樣細胞；HEH2價格質(zhì)量保證:    
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。 細胞到達客戶手中，1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導致細胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費再向客戶提供一次。

人胚胎心臟成纖維樣細胞；HEH2價格操作步驟：

1）貼壁細胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi)，吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a(chǎn)生大量的氣泡，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱
形態(tài)特性  成纖維細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性  該細胞系來源于一男性胎兒的心臟組織，2009年由中科院昆明細胞庫建立。 
培養(yǎng)條件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  15%FBS
傳代方法  1：2傳代；3-4天一次
傳代情況 P2
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法（-）
STR  -
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 A類
細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時，應將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。

RNA  DEPC ( 焦碳酸二乙酯 )    10mL
RNA  DTT ( 二硫代蘇糖 )    10g
RNA  EDTA·2Na ( 乙二胺四乙酸二鈉 )    100g
RNA  Guanidium HCl ( 鹽酸胍 )    100g
RNA  GuSCN( 異硫氰酸胍 )    100g
RNA  Oligo(dT) 纖維素    25mg
RNA  PVP K30( 聚乙烯基吡咯烷酮 K30)     100g
RNA  Sarkosyl( 月桂酰 -N- 甲基氨基乙酸鈉 )     100g
RNA  SDS( 十二烷基硫酸鈉 )    100g
RNA  Tris Base( 三羥甲基氨基甲烷 )    100g
RNA 溶解液    10mL
RNA 洗脫液    10mL
RNA 洗脫液    50mL
RNA 長效保存液    1.5mL
RNAi，RNA 干擾載體及基因片段等系列    2 μg
RNase A 干粉    100mg5-Chloro-N-[4-（cyclohexylureidosulfonyl）phenethyl]-2-methoxybenzamide； Glyburide， N-p-[2-（5-Chloro-2-methoxybenzamido）ethyl]benzenesulfonyl-N’-cyclohexylureaGlibenclamide
N-（4-（（6，7-Dimethoxyquinolin-4-yl）oxy）phenyl）-N-（4-fluorophenyl）cyclopropane-1，1-dicarboxamideCarbozantinib
POE （20） sorbitan monooleate， Polyethylene glycol sorbitan monooleate， Polyoxyethylenesorbitan monooleate， Polysorbate 80Tween 80， MegaPure Detergent， 10% Solution
2-[（1，2-Dihydro-2-oxo-3H-indol-3-ylidene）methyl]-4-meth yl-1H-pyrrole-3-propanoic acidSU-5402
2-（2-propylpyridin-4-yl）-4-（p-tolyl）thiazoleFatostatin
N-（4-Chloro-3-trifluoromethyl-phenyl）-2-ethoxy-6-pentadecyl-benzamideHAT Activator， CTPB
2-Amino-9-[（2R，3R，4S，5R）-3，4-dihydroxy-5-（hydroxymethyl）-2-tetrahydrofuranyl]-3，7-dihydropurine-6，8-dione； 8-Oxoguanosine8-Hydroxyguanosine
（2E）-1-（6，7-Dimethoxy-3，4-dihydro-1H-isoquinolin-2-yl）-3-（1-methyl-2-phenyl-1H-pyrrolo[2，3-b]pyridin-3-yl）-propenone hydrochlorideSmad3 Inhibitor， SIS3
（2S，3S，4S）-Carboxy-4-（1-methylethenKainic acid
Sulfo-SANPAH； Sulfo SANPAH； N-Sulfosuccinimidyl-6-（4’-azido-2’nitrophenylamino） hexanoate； nitrophenyl azide sulfo NHS ester； Sulfo-NHS-6-（4’-azido-2’nitrophenylamino）- hexanoateSulfo-SANPAH
2-Pyrimidinamine， N-[4-（4-ami-piperidinyl）-2-methoxyphenyl]-5-chloro-4-（1H-indol-3-ylAZD-3463
Mambalgin-1Mambalgin-1
N-[（3-hydroxyphenyl）methyl]-N’-[4-（4-pyridinyl）-2-thiazolyl ureaRKI-1447
3，4’，5，7-Tetrahydroxyflavone， 3，5，7-Trihydroxy-2-（4-hydroxyphenyl）-4H-1-benzopyran-4-one， RobigeninKaempferol
RNase A 干粉    500mg
RNase A 溶液，10mg/mL    1.5mL
RNase A 溶液，2mg/mL    1.5mL
RNase 抑制劑 ( 人源 )    2500U
RNase 抑制劑 ( 人源 )    400U
RNase 抑制劑 ( 小鼠源 )    3000U
RNase 抑制劑 ( 豬源 )    500U