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詳細(xì)介紹
人晶體上皮細(xì)胞永生系；SRA01/04（HLE）價(jià)格質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購(gòu)買(mǎi)到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè)，100%進(jìn)口來(lái)源，100%保證5代以?xún)?nèi)，活力>95%，無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶(hù)手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶(hù)提供一次。
人晶體上皮細(xì)胞永生系；SRA01/04（HLE）價(jià)格操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。
【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱(chēng)
形態(tài)特性 上皮樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 20%FBS
傳代方法 1:3傳代；3~4天1次。
傳代情況
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法（-）
STR Amelogenin：X，Y；CSF1PO：11，13，15；D13S317：10；D16S539：10；D18S51：13；D19S433：14；D21S11：27，28，31；D2S1338：23，24；D3S1358：14，15；D5S818：11，12，13；D7S820：10，11，13；D8S1179：14，15；FGA：19，20，22.2；TH01：6，7；TPOX：8；vWA：17，20
同工酶
染色體
使用權(quán)限 B類(lèi)
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
絲狀真菌粒體 DNAout 15 次
四氮唑藍(lán) (NBT) 250mg
四甲基乙二胺 25mL
四甲基乙二胺 25mL
四硼酸鈉，十水 100g
四鹽酸精胺 1g
四氧嘧啶 5g
蘇丹Ⅲ 5g
蘇丹 B 5g
蘇木色精 10g
蘇木素染色液 15mL
宿主細(xì)胞系列 1mL
酸酚 100mL
酸水解酪素 100g
酸洗玻璃珠系列 10g
酸性磷酸酶 1g
酸性磷酸酶檢測(cè)試劑盒 120 次
酸性品紅 5g
隨機(jī)引物法 DNA 探針標(biāo)記試劑盒 5次
HEPES Buffer （500 mM； pH 8。0） （10 ml）HEPES Buffer （500 mM； pH 8。0）
CP 47，497-C6-homolog （10 mg）cis-5-（1，1-dimethylhexyl）-2-（3-hydroxycyclohexyl）-phenol； CP 47，497-C6-homolog
α-Linolenoyl Ethanolamide-d4 （1 mg）N-（2-hydroxyethyl-1，1’，2，2’-d4）-octadeca-9Z，12Z，15Z-trienamide； α-Linolenoyl Ethanolamide-d4
Donepezil （50 mg）2，3-dihydro-5，6-dimethoxy-2[[1-（phenylmethyl）-4-piperidinyl]methyl]-1H-inden-1-one； Aricept ； Donepezil
Prostaglandin Screening Library I （96-Well） （200 ul）Prostaglandin Compound Screening Library 1
Resolvin D1-d5 （10 ug）17（S）-Resolvin D1-d5|RvD1-d5； 7S,8R,17S-trihydroxy-4Z,9E,11E,13Z,15E,19Z-21,21’,22,22,22-d5 docosahexaenoic acid
2-methoxy Ketamine （hydrochloride） （5 mg）2-（2-methoxyphenyl）-2-（methylamino）-cyclohexanone, monohydrochloride
（±）8-HEPE （100 ug）（±）-8-hydroxy-5Z，9E，11Z，14Z，17Z-eicosapentaenoic acid； （±）8-HEPE
9（S）-HETE （50 ug）9S-hydroxy-5Z，7E，11Z，14Z-eicosatetraenoic acid； 9（S）-HETE
FeTMPyP （25 mg）Fe（III）tetrakis （1-methyl-4-pyridyl） porphyrin pentachlorideporphyrin pentachloride； FeTMPyP
Cisplatin （250 mg）CDDP|Cisplatinum|NSC 119875|cis-Diamminedichloroplatinum； （SP-4-2）-diamminedichloro-platinum
Bromosporine （10 mg）ethyl （3-methyl-6-（4-methyl-3-（methylsulfonamido）phenyl）-[1,2,4]triazolo[4,3-b]pyridazin-8-yl）carbamate
隨機(jī)引物法 DNA 探針地高標(biāo)記試劑盒 5次
隨機(jī)引物法 DNA 探針生物素標(biāo)記試劑盒 5次
髓核細(xì)胞生長(zhǎng)因子 5mL
梭菌蛋白酶 10μg
羧芐鈉 1g
羧芐溶液 ,50mg/mL 1mL
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