EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞；KMY1002圖片

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞；KMY1002圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞；KMY1002圖片
形態(tài)特性  淋巴母細(xì)胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性  該細(xì)胞系來源于一無精癥男性的外周血。2010年由中科院昆明細(xì)胞庫通過EB病毒轉(zhuǎn)化的方法建立。 
培養(yǎng)條件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  15%NBS
傳代方法  1:2傳代；5-6天一次
傳代情況 P3
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法（-）
STR  -
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進(jìn)口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。   細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

Beraprost （sodium salt） （5 mg）2，3，3a，8b-tetrahydro-2-hydroxy-1-（3-hydroxy-4-methyl-1-octen-6-ynyl）-1H-cyclopenta[b]benzofuran-5-butanoic acid， monosodium salt； ML 1129|Procyclin|TRK 10Beraprost （sodium salt）
Leukotriene B3 （25 ug）5S，12R-dihydroxy-6Z，8E，10E-eicosatrienoic acid； LTB3； Leukotriene B3
Prostaglandin E2-d4 （5 mg）9-oxo-11α，15S-dihydroxy-prosta-5Z，13E-dien-1-oic-3，3，4，4-d4 acid； Dinoprostone-d4|PGE2-d4； Prostaglandin E2-d4
5-OxoETE-d7 （50 ug）5-oxo-6E，8Z，11Z，14Z-eicosatetraenoic-6，8，9，11，12，14，15-d7 acid； 5-KETE-d7； 5-OxoETE-d7
6-trans-12-epi Leukotriene B4 （25 ug）5S，12S-dihydroxy-6E，8E，10E，14Z-eicosatetraenoic acid； 5（S），12（S）-DiHETE|6-trans-12-epi LTB4； 6-trans-12-epi Leukotriene B4
13-OxoODE （100 ug）13-oxo-9Z，11E-octadecadienoic acid； 13-KODE； 13-OxoODE
Sodium Acetate （500 dtn （4。1 g））Sodium Acetate
Corticosterone AChE Tracer （100 dtn）Corticosterone AChE Tracer
Latanoprost AChE Tracer （100 dtn）Latanoprost AChE Tracer
Vilogenin （carp） Standard （5 ea）Vilogenin （carp） Standard
9（S）-HpODE （100 ug）9S-hydroperoxy-10E，12Z-octadecadienoic acid； 9（S）-HpODE
Methionine Sulfoxide Positive Control （1 ea）Methionine Sulfoxide Positive Control
Sodium Acetate Stock Solution （3 M， pH 5。2） （250 mL）Sodium Acetate Stock Solution （3 M， pH 5。2）人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（hMSCs）
HCC38(人腺導(dǎo)管細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
D/E中和瓊脂/D-E中性瓊脂/戴伊恩格利中和瓊脂/ D/E Neutralizing Agar衛(wèi)生環(huán)境中微生物的分離培養(yǎng), 消毒效果測定250克國產(chǎn)/進(jìn)口
FaDu(人咽鱗細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
GST標(biāo)簽蛋白裂解液20 ug20μg、100μg
小鼠胰腺星狀細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
BRL-3A(大鼠正常肝細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
小鼠肺成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
細(xì)胞周期與細(xì)胞凋亡檢測試劑盒規(guī)格：500次
人小氣道上細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
KORSER氏枸櫞酸鹽肉湯/KORSER氏檸檬酸鹽肉湯/Korser Citrate Sodium Broth用于細(xì)菌的枸櫞酸鹽試驗100克國產(chǎn)/進(jìn)口
人內(nèi)臟脂肪細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
標(biāo)準(zhǔn)Ⅱ號營養(yǎng)瓊脂/標(biāo)準(zhǔn)2號營養(yǎng)瓊脂/Standard Ⅱ Nutrient Agar不含糖,可作血瓊脂基礎(chǔ)和傳代用250克國產(chǎn)/進(jìn)口
人成纖維肉瘤細(xì)胞英文名稱：HT1080
聚蛋白胨/多聚蛋白胨/多價蛋白胨/PolypeptoneBR250/500/1000克國產(chǎn)/進(jìn)口
大鼠小腸平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
禽膽鹽/Bile salt from poultryBR25克國產(chǎn)/進(jìn)口
Y3-Ag 1.2.3(大鼠骨髓瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
氧化發(fā)酵試驗培養(yǎng)基/OF培養(yǎng)基/Hugh-Leifson培養(yǎng)基/HLGB細(xì)菌的氧化發(fā)酵試驗250克國產(chǎn)/進(jìn)口
SF763(人腦瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
PAF C-16 （5 mg）1-O-hexadecyl-2-O-acetyl-sn-glyceryl-3-phosphorylcholine； Plaet-activating Factor C-16； PAF C-16