詳細(xì)介紹
人結(jié)直腸癌細(xì)胞;T84圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱 人結(jié)直腸癌細(xì)胞;T84圖片
形態(tài)特性 上皮樣;多角
生長特性 貼壁生長
特征特性 T84細(xì)胞來源于一位72歲的男性結(jié)直腸癌患者的肺部轉(zhuǎn)移灶;皮下接種至BALB/c裸鼠并連續(xù)傳代23次后建立該細(xì)胞系。在裸鼠身上傳代的過程中,該腫瘤仍保持原始的結(jié)直腸癌的組織學(xué)特性。T84細(xì)胞系生長至匯合狀態(tài)時(shí)形成單層細(xì)胞,相鄰細(xì)胞間有緊密連接和細(xì)胞橋粒;該細(xì)胞有多種肽類激素和神經(jīng)遞質(zhì)的受體,維持電解質(zhì)的定向運(yùn)輸;角蛋白陽性。
培養(yǎng)條件 DMEM/F12(1:1): Ham's F12/DME Medium (DME H-16/F-12 50% Mixture w/o HEPES, with NEAA Medium) 10%FBS
傳代方法 1:2~1:4傳代;每周2次。
傳代情況 C5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:X;CSF1PO:10;D13S317:9;D16S539:10,11;D18S51:17;D19S433:13;D21S11:31;D2S1338:23,26;D3S1358:19;D5S818:12;D7S820:8,10;D8S1179:15;FGA:24;TH01:6,9;TPOX:8,11;vWA:17,18;
同工酶
染色體 51~60
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進(jìn)口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
葡萄糖肉浸液肉湯/Dextrose Meat Infusion Broth用于溶血性鏈球菌的增菌培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進(jìn)口
成纖維細(xì)胞英文名稱:3T3
亞碲酸鹽肉湯基礎(chǔ)/亞碲酸鈉肉湯培養(yǎng)基基礎(chǔ)/lurite Broth Base金黃色葡萄球菌的增菌培養(yǎng),每100ml培養(yǎng)基需另加入1%亞碲酸鈉1ml250克國產(chǎn)/進(jìn)口
SK-MEL-1, 人膚黑色素瘤細(xì)胞
NCI-H520(人肺鱗細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
Normal Goat Serum For Blocking/封閉用山羊血清工作液(免疫組化封閉液)10ml國產(chǎn)gersion
CAL-27(人舌鱗細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
Mammalian Protein Extraction Reagent/哺動(dòng)物蛋白抽提試劑25次、100次國產(chǎn)
Jurkat, Clone E6-1 (人急性T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
Hela(人宮頸細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
中華鱉心肌來源細(xì)胞英文名稱:CSSTH1
CEM/C1(人急性淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
小鼠畸胎瘤細(xì)胞英文名稱:Pcc4Isopropyl chloroformate酸異丙酯108-23-6
Daminozide丁酰肼1596-84-5
Bis(2-methylpropyl) oxalate草酸二異丁酯2050-61-5
2-Mercapto-5-methyl-1,3,4-thiadiazole2-巰基-5-基-1,3,4-噻二唑29490-19-5
Z-D-GLU(OBZL)-OHZ-D-GLU(OBZL)-OH59486-73-6
m-Tolyl isocyanate異酸間酯621-29-4
TRIMETHOXY(7-OCTEN-1-YL)SILANE7-基三氧基硅烷52217-57-9
NA硬脂酸鑭
Columbianadin二氫歐山芹醇當(dāng)歸酸酯5058-13-9
Thiobencarb禾草丹28249-77-6
Octaphenylsilsesquioxane八基-POSS5256-79-1
FMOC-GLN(TRT)-WANG RESINFMOC-GLN(TRT)-WANG RESIN
(S)-(-)-2,2'-Diami,1'-binaphthalene(S)-(-)-1,1'-聯(lián)-2-萘胺18531-95-8
10-Deacetylbaccatin III10-去乙?;涂ㄍ?2981-86-5
TERT-BUTYL PROPIOLATE叔丁基酸酯13831-03-3
1-Methoxynaphthalene1-萘2216-69-5
3,4,5,6-Tetrahydrophthalic anhydride3,4,5,6-四氫酐2426-02-0
2-Bromo-4-methoxy-5-(benzyloxy)benzaldehyde2-溴-4-氧基-5-芐氧基6451-86-1
Dihydromyricetin二氫楊梅素27200-12-0
Isopentyl formate酸異酯110-45-2
4T1(小鼠腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
人轉(zhuǎn)移胰腺腺細(xì)胞英文名稱:AsPC-1
雙洗瓊脂平板10塊國產(chǎn)/進(jìn)口
HAVSMC, 人主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞
人高分化胃細(xì)胞英文名稱:NCI-N87