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詳細(xì)介紹
TNFa轉(zhuǎn)染耐VP16絨癌細(xì)胞；JEG-3-VP16-TNFa價格質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進(jìn)口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
TNFa轉(zhuǎn)染耐VP16絨癌細(xì)胞；JEG-3-VP16-TNFa價格操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。
【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱
形態(tài)特性 上皮樣；多角
生長特性 貼壁生長
特征特性 表達(dá)TNFα。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS；400ug/ml G418
傳代方法 1:3傳代；3~4天1次。
傳代情況 C5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法（-）
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
NCI-H1299(人非小細(xì)胞肺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
HO-8910(人卵巢細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
Bcap-37(人腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
DU 145(人前列腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
小鼠下脂肪細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
AGS(人胃腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
豚鼠心肌來源細(xì)胞英文名稱：GPH4
3.5% NaC1甘露醇發(fā)酵管BR20支國產(chǎn)/進(jìn)口
人腎動脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
NZM肉湯/NZM BrothBR100克國產(chǎn)/進(jìn)口Calcium carbide碳化鈣75-20-7
Glycitin黃豆黃苷40246-10-4
cis-3-Hexenyl formate酸葉醇酯33467-73-1
Phenol酚108-95-2
1,4-Dibromobutane1,4-二溴丁烷110-52-1
4-(DIFLUOROMETHOXY)-3-(CYCLOPROPYLMETHOXY)-BENZALDEHYDE4-(二氧基)-3-(環(huán)丙基氧基)151103-09-2
D-Alanine tert-butyl ester hydrochlorideD-丙氨酸叔丁酯酸59531-86-1
TRI-M-TOLYLPHOSPHINE三間基基膦6224-63-1
DIAION HP-2MG, 100GM大孔吸附樹脂
Chloramben氨二酸133-90-4
CYANINE花苷523-42-2
4-Aminobutyric acid4-氨基丁酸1956/12/2
TRIETHANOLAMINE HYDROCHLORIDE三乙醇胺酸637-39-8
PYRAZINE-2-CARBOXAMIDINE HYDROCHLORIDE2-吡嗪脒138588-41-7
(-)-FENCHONED(+)-茴香4695-62-9
N-Fmoc-S-(4-methoxybenzyl)-L-cysteineN-Fmoc-S-(4-氧基芐基)-L-半胱氨酸141892-41-3
Acetaldoxime乙肟107-29-9
N,N'-BIS(3-AMINOPROPYL)ETHYLENEDIAMINEN,N-二(3-氨丙基)乙基乙胺10563-26-5
Nebivolol hydrochloride奈比洛爾酸152520-56-4
(-)-MAACKIAIN馬卡因19908-48-6
4',6-Diamidino-2-phenylindole dihydrochlorideDAPI染色液28718-90-3
PROCAINE普魯卡因59-46-1
4-(2-PYRIDYLAZO)RESORCINOL4-（2-吡啶偶氮）間二酚1141-59-9
人角膜內(nèi)細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
酚紅葡萄糖肉湯/Phenol Red Dextrose Broth蠟樣芽孢桿菌葡萄糖分解試驗250克國產(chǎn)/進(jìn)口
急性T淋巴細(xì)胞白血病英文名稱：Jurkat（懸浮）
卵磷脂（大豆）/大豆卵磷脂/磷脂酰膽堿/L-a-磷脂酰膽酰/蜂王漿/SPCBR，PC=26%250/25/100/1000克國產(chǎn)/進(jìn)口
大鼠腦膜細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
SW579(人甲狀腺鱗細(xì)胞 )5×106cells/瓶×2
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