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人惡性黑色素瘤瘤株；A-375 [A375]圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱 人惡性黑色素瘤瘤株；A-375 [A375]圖片
形態(tài)特性 實(shí)體瘤
生長特性 體內(nèi)生長
特征特性 利用培養(yǎng)的細(xì)胞系，進(jìn)行裸鼠體內(nèi)移植，形成實(shí)體瘤，凍存，可用于建立人黑色素瘤的體內(nèi)移植模型。
培養(yǎng)條件 -
傳代方法 制備成細(xì)胞懸液接種至免疫缺陷小鼠成瘤。
傳代情況 C1
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法（-）
STR -
同工酶
染色體 -
使用權(quán)限 A類
人惡性黑色素瘤瘤株；A-375 [A375]圖片細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
人惡性黑色素瘤瘤株；A-375 [A375]圖片質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進(jìn)口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
人惡性黑色素瘤瘤株；A-375 [A375]圖片操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。
DNA 洗脫液10mL
即用型熒光定量 PCR 試劑盒600 次
可逆性鋅染試劑盒1套
CAS25952-53-8乙基二甲基胺丙基碳化二亞胺1g
130883-50磷酸化蛋白純化試劑盒50 次
Zinquin 乙酯5mg
鏈霉菌 PCR Mix 6100 次
1000 μL RNase-free 藍(lán)吸頭 ( 袋裝 )1000 支
Zinquin 乙酯5mg
β- 瓊脂糖酶Ⅰ500U
18-0670-48游離脂肪酸測試盒48 T
80915B-100超雜交液 B（含甲酰胺）100mL
TE 緩沖液，PH7.010mL
非凍型細(xì)菌 RNA 保存液100mL
硼氫化氰5g
HRP 標(biāo)記的抗地高抗體10μL
CAS92-71-72,5- 二苯基惡唑5g
12-219Tuner(DE3)plysS 菌種1mL
一步式胞漿蛋白微量制備試劑盒30 次Niobium oxide化二鈮1313-96-8
Chlorocyclohexane代環(huán)己烷542-18-7
METHYSTICIN麻醉椒苦素495-85-2
Ethyl 4-bromobutyrate4-溴丁酸乙酯2969-81-5
TRIS(2,4,6-TRIMETHOXYPHENYL)PHOSPHINE三（2,4,6 -三氧基基）膦91608-15-0
Kanamycin sulfate硫酸卡那霉素25389-94-0
ALPHA,ALPHA,ALPHA',ALPHA'-TETRABROMO-M-XYLENE間-雙溴基36323-28-1
2-Amino-3,5-dichlorobenzonitrile2-氨基-3,5-二36764-94-0
2-Amino-3-pyridinecarboxaldehyde2-氨基-3-吡啶7521-41-7
Chlorodiphenylphosphine代二基膦1079-66-9
Pyruvic acid丙酸127-17-3
Carnauba wax棕櫚蠟8015-86-9
NO3--N in Water酸氮標(biāo)準(zhǔn)溶液
(L-3-TRANS-CARBOXYOXIRANE-2-CARBONYL)-L-LEUCYLAGMATINE HEMIHYDRATEN-(反式-環(huán)氧丁二酰基)-L-亮氨酸-4-胍基丁基酰胺66701-25-5
人惡性黑色素瘤瘤株；A-375 [A375]圖片X-PHOS2-二環(huán)己基磷-2',4',6'-三異丙基聯(lián)564483-18-7
Cianidanol兒茶素154-23-4
RONGALITE吊白塊149-44-0
2,6-Dinitrobenzaldehyde2,6-二基606-31-5
METHYLTRIOXORHENIUM(VII)基三氧化錸70197-13-6
4-BROMOBUTYRYL CHLORIDE4-溴丁酰927-58-2
Nitrocellulose lacquer thinner香蕉水
Calcium formate酸鈣544-17-2
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