詳細(xì)介紹
人舌鱗癌細(xì)胞;CAL-27價格質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進(jìn)口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
人舌鱗癌細(xì)胞;CAL-27價格操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱
形態(tài)特性 上皮細(xì)胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細(xì)胞1982年由J. Gioanni建系,源自一位56歲白人男性的舌頭中倍的病變部位,角蛋白強(qiáng)陽性。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 1:6傳代,2~3天換液一次
傳代情況 P52
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:X;CSF1PO:10,12;D13S317:10,11;D16S539:11,12;D18S51:13;D19S433:14,15.2;D21S11:28,29;D2S1338:23,24;D3S1358:16;D5S818:11,12;D7S820:10;D8S1179:13,15;FGA:21,25;TH01:6,9.3;TPOX:8;vWA:14,17;
同工酶
染色體 43,異倍體
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時,應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
18-0200-48超氧化物歧化酶測試盒48 T
101217-100DNA SDS( 十二烷基硫酸 )100g
SYBR Green II 核酸染料100 μL
DNA 電泳分子量標(biāo)準(zhǔn) (3)λDNA/BstE II50 次
柱式動物 DNAout50 次
TB1 菌種1mL
101002-250KOD DNA 聚合酶250U
60601-3DNA UV 防護(hù)劑3g
隨機(jī)引物法 DNA 探針地高標(biāo)記試劑盒5次
單孢子全基因組擴(kuò)增試劑盒30 次
印跡膜抗體稀釋液100mL
GAPDH 小鼠單抗1000μL
130635-250T7 核酸內(nèi)切酶 I250U
100839-5甲酰胺,PCR 5mL
天凈沙 SPIA 擴(kuò)增試劑盒 ( 用于擴(kuò)增 DNA 模板 )20 次
EDTA 溶液 ,0.5M, 蛋白10mL
細(xì)菌總蛋白質(zhì)微量提取試劑盒30 次2-(METHACRYLOYLOXY)ETHYL ACETOACETATE乙酰乙酸基丙酸乙二醇酯21282-97-3
Methyl 2-chloropropionate2-丙酸酯17639-93-9
acetic acid, mercaptophenyl-, ethyl ester, s-ester with o,o-dimethyl phosphorod稻豐散13376-78-8
COBALT(II) CARBONATE HYDRATE碳酸鈷(II)57454-67-8
METHYL 2-CHLORONICOTINATE2-煙酸酯40134-18-7
TRIETHYL 1,1,2-ETHANETRICARBOXYLATE1,1,2-乙烷三羧酸三乙酯7459-46-3
2,5-Dimethoxy-4-chloroaniline4--2,5-二氧基胺6358-64-1
Cyclohexylamine環(huán)己胺108-91-8
PONCIRIN枸橘苷14941-08-3
Isopropyl 2-methoxyethyl 1,4-dihydro-2,6-dimethyl-4-(m-nitrophenyl)-3,5-pyridinedicarboxylate尼莫地平66085-59-4
Disodium uridine-5'-monophosphate尿苷酸二3387-36-8
(1R,2R)-N,N'-Dimethyl-1,2-cyclohexanediamine(1R,2R)-(-)-N,N'-二基環(huán)己烷-1,2-68737-65-5
NA無酯乙醇
DL-2-Aminobutyric acidDL-2-氨基丁酸2835-81-6
Actinomycin D放線菌素D50-76-0
L-Lactic dehydrogenaseL-乳酸脫氫酶9001-60-9
Diallylamine二丙基胺124-02-7
Saponin皂素8047-15-2
Sodium hypophosphite次磷酸7681-53-0
Ziconotide acetate醋酸齊考諾肽107452-89-1
顯影定影套裝1套
CAS14375-45-2脫落酸25mg
131128E-100動物種屬鑒定 PCR Mix 5100 次
Xa 因子蛋白酶50μg