詳細(xì)介紹
綠色熒光蛋白標(biāo)記人結(jié)直腸癌細(xì)胞;HCT116-GFP*操作步驟:
1. 將無(wú)菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中,將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片,待細(xì)胞長(zhǎng)至80%時(shí)取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過(guò)氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育:按照抗體說(shuō)明書(shū)稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對(duì)應(yīng)的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽(yáng)性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染:用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍(lán)。
10. 封片:將中性樹(shù)膠滴在爬片一側(cè),再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),以免產(chǎn)生氣泡,封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
綠色熒光蛋白標(biāo)記人結(jié)直腸癌細(xì)胞;HCT116-GFP*現(xiàn)貨直銷,免費(fèi)快遞送貨上門。公司供應(yīng)各種細(xì)胞株,細(xì)胞系,種類齊全,現(xiàn)貨,質(zhì)量保證,公司所有產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于醫(yī)學(xué)診斷。使用前仔細(xì)閱讀本說(shuō)明書(shū)。
產(chǎn)品名稱 | |
用途 | 僅用科研 |
保存條件 | 4℃保存一年;-20℃長(zhǎng)期保存 |
細(xì)胞名稱
形態(tài)特性 上皮樣;多角形
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 GFP穩(wěn)定表達(dá)
培養(yǎng)條件 IMDM: Iscove's Modiefied Dulbecco's Medium 10%FBS;200ug/ml G418
傳代方法 1:3傳代;3~4天1次。
傳代情況
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:X,Y;CSF1PO:7,10;D13S317:10,12;D16S539:11,13;D18S51:16,17;D19S433:12,13;D21S11:29,30;D2S1338:16;D3S1358:12,18,19;D5S818:10,11;D7S820:11,12;D8S1179:12,14;FGA:18,23;TH01:8,9;TPOX:8;vWA:17,22;
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
運(yùn)輸保存:
采用干冰保存運(yùn)輸。收到細(xì)胞時(shí),若干冰已經(jīng)*融化,請(qǐng)立即將細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng);若尚留有干冰,請(qǐng)立即將細(xì)胞放入液氮中保存待用,請(qǐng)按條件貯存細(xì)胞,切不可將細(xì)胞置于高溫環(huán)境。
保存條件:4℃保存一年;-20℃長(zhǎng)期保存
用途:只可用于科研。
儲(chǔ)存:液氮。
運(yùn)輸:干冰(第二代培養(yǎng)末期液氮凍存)。
細(xì)胞一般2-3天更換一次培養(yǎng)基,這取決于細(xì)胞生長(zhǎng)的速度。許多細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室通常在周一,周三,周五更換培養(yǎng)基。
注意:*次植入后,在6-16小時(shí)內(nèi)更換培養(yǎng)基,以去除殘留的二甲基亞楓和死亡細(xì)胞。到達(dá)客戶手中,出現(xiàn)任何問(wèn)題(人為或者非人為),導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。對(duì)于細(xì)胞的真實(shí)性,支持客戶檢測(cè)對(duì)應(yīng)的biomarker,(如證明細(xì)胞錯(cuò)誤,全額退款。)公司針對(duì)每株細(xì)胞,鑒定gene background,鑒定完成的細(xì)胞可以提供數(shù)據(jù),用于證明細(xì)胞的真實(shí)性,并且?guī)椭蛻舾嗟牧私饧?xì)胞特性。
Southern 血液 DNAout10 次
DL- 蘋果酸100g
免質(zhì)粒提取篩選試劑盒1000 次
DB3.1 菌種1mL
130407-1克必隆 eTS cDNA 文庫(kù)構(gòu)建試劑盒1套
90212-100高載量 PCR 片段純化試劑盒100 次
水飽和正丁醇10mL
大鼠內(nèi)皮細(xì)胞分離液 1.066200mL
雙染細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒(Annexin V-FITC·PI)50 次
抑氨肽酶,5mg/mL5mL
17-0080HindIII2000U
100848-5ECL 法地高雜交檢測(cè)試劑盒5次
Tubulin-Tracker Red( 微管紅色熒光探針 )40μL
對(duì)苯醌固定液250 mL
TdT 加尾法 DNA 標(biāo)記試劑盒5次
RecA 蛋白200μg
D013-1動(dòng)植物種屬鑒定1 個(gè)樣
130694-25m7G(5´)ppp(5´)G 帽結(jié)構(gòu)類似物25 OD
胃蛋白酶250mg
G(5´)ppp(5´)A 帽結(jié)構(gòu)類似物25 ODETHYLLITHIUM乙基鋰811-49-4
Black currant extrac加侖提取物
Swertiamarine獐牙菜苦甙17388-39-5
1-NAPHTHYLAMINE-3,6,8-TRISULFONIC ACID DISODIUM SALT HYDRATE8-氨基1,3,6-萘三磺酸二5398-34-5
Nickel oxide三氧化二鎳1314-06-3
1,2-Dibromopropane1,2-二溴丙烷78-75-1
Bullatine B雪上一枝蒿乙素466-26-2
Dimethyl isophthalate間二酸二酯1459-93-4
Diisooctyl sebacate癸二酸二異酯27214-90-0
ISOPROPYLMAGNESIUM BROMIDE異丙基溴化鎂920-39-8
1,2,5,6,9,10-Hexabromocyclododecane六溴環(huán)十二烷3194-55-6
2-CYANOETHYLTRIETHOXYSILANE3-三乙氧硅基919-31-3
Furfuryl acetate乙酸糠酯623-17-6
N,N-DIETHYL-P-PHENYLENEDIAMINE MONOHYDROCHLORIDEN,N-二乙基對(duì)酸2198-58-5
Lanthanum(III) nitrate hexahydrate酸鑭10277-43-7
4-NITROPHENYL-ALPHA-D-GLUCOPYRANOSIDE對(duì)基-α-D-葡萄糖吡喃苷3767-28-0
1-Naphthylacetamide1-萘乙酰胺86-86-2
6-Hydroxy-2-naphthoic acid6-羥基-2-萘酸16712-64-4
2-(Trifluoromethoxy)aniline鄰氨基三氧基1535-75-7