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詳細(xì)介紹
人子宮內(nèi)膜低分化腺癌細(xì)胞；EAG3圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱 人子宮內(nèi)膜低分化腺癌細(xì)胞；EAG3圖片
形態(tài)特性 上皮樣；多角形
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性
培養(yǎng)條件 DMEM/F12(1:1): Ham's F12/DME Medium (DME H-16/F-12 50% Mixture w/o HEPES, with NEAA Medium) 10%FBS
傳代方法 1:2傳代，3天傳代一次
傳代情況 P21
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+36%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法（-）
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測(cè)，100%進(jìn)口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。
角質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)因子 - 不含 BPE5mL
L- 甲硫氨酸25g
ECL 法生物素雜交檢測(cè)試劑盒5次
CAS3150-24-1對(duì)硝基苯 -β-D- 吡喃半乳糖苷1g
130584-1000小鼠抗 T7 標(biāo)簽單抗1000μL
植物種屬鑒定 PCR Mix 1100 次
L- 蘋果酸25g
蘇丹Ⅲ5g
超敏化學(xué)發(fā)光（HRP）檢測(cè)試劑盒 2.0 50mL
CAS112926-00-8變色硅膠50g
100909-200長(zhǎng)效期 SDS-PAGE 配膠液200mL
柱式質(zhì)粒 DNAout50 次
魯米諾1g
梭菌蛋白酶10μg
H5N1 神經(jīng)氨酸酶抑制劑鑒定試劑盒100 次 Anthraquinone蒽醌84-65-1
Propyl 4-hydroxy-3-iodobenzoate4-羥基-3-碘酸丙酯15126-08-6
1-Indanone1-茚83-33-0
Nalpha-Fmoc-L-tyrosineFmoc-L-酪氨酸92954-90-0
Methyl 2,5-dihydroxybenzoate2，5-二羥基酸酯2150-46-1
5-METHOXY-2-METHYLINDOLE5-氧基-2-基吲哚1076-74-0
Tetracaine丁卡因94-24-6
3-Cyanobenzoic acid3-基酸1877-72-1
DL-Arginine hydrochloride monohydrateDL-精氨酸酸(一水)32042-43-6
4-Nitrophenyl isocyanate異酸對(duì)基100-28-7
Vinyltrimethoxysilane乙基三氧基硅烷2768/2/7
NA(R)-2-四氫萘胺
FRAXINELLONE梣28808-62-0
MONALIDE庚酰草胺7287-36-7
lurium tetrachloride四化碲10026-07-0
FMOC-CYS(ACM)-WANG RESINFMOC-CYS(ACM)-WANG RESIN
3-Methylphenethyl alcohol3-基乙醇1875-89-4
Harpagoside哈巴俄苷19210-12-9
Ethyl (trimethylsilyl)acetate三基硅乙酸乙酯4071-88-9
3,4',5-TRIMETHOXY-TRANS-STILBENE白藜蘆醇三22255-22-7
Dibenzothiophene二并噻吩132-65-0
4-Fluorophenethyl alcohol對(duì)乙醇7589-27-7
CAS9001-12-1膠原酶Ⅰ型100mg
131150-100山羊抗小鼠 IgG(H+L)，辣根過氧化物酶標(biāo)記100μL
80929-250液體樣品 RNAout250 次
N- 三 ( 羥甲基 ) 甲基 -2- 氨基乙烷磺酸5g
4mL DNA 離心超濾管 (150-250 KD)1個(gè)
前脂肪細(xì)胞生長(zhǎng)因子5mL
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