人喉癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移細(xì)胞；LLN說(shuō)明書(shū)

人喉癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移細(xì)胞；LLN說(shuō)明書(shū)采用干冰保存運(yùn)輸。收到細(xì)胞時(shí)，若干冰已經(jīng)*融化，請(qǐng)立即將細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng)；若尚留有干冰，請(qǐng)立即將細(xì)胞放入液氮中保存待用，請(qǐng)按條件貯存細(xì)胞，切不可將細(xì)胞置于高溫環(huán)境。

人喉癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移細(xì)胞；LLN說(shuō)明書(shū)現(xiàn)貨直銷，免費(fèi)快遞送貨上門(mén)。公司供應(yīng)各種細(xì)胞株，細(xì)胞系，種類齊全，現(xiàn)貨，質(zhì)量保證，公司所有產(chǎn)品僅供科研使用，不得用于醫(yī)學(xué)診斷。使用前仔細(xì)閱讀本說(shuō)明書(shū)。

產(chǎn)品名稱	人喉癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移細(xì)胞；LLN說(shuō)明書(shū)
用途	僅用科研
保存條件	4℃保存一年;-20℃長(zhǎng)期保存

細(xì)胞名稱
形態(tài)特性  上皮樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性  與人喉癌細(xì)胞LCC為同一人來(lái)源，是淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶經(jīng)原代培養(yǎng)獲得的細(xì)胞系。 
培養(yǎng)條件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  20%FBS
傳代方法 
傳代情況 
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法（-）
STR  Amelogenin：x,y；CSF1PO：12,12；D12S391：20,23；D13S317：11,12；D16S539：11,12；D18S51：13,13；D19S433：13,14；D21S11：29,29；D2S1338：17,18；D3S1358：16,16；D5S818：12,12；D6S1043：14,18；D7S820：8,8；D8S1179：14,17；FGA：25,25；Penta E：9,10；TH01：9,9；TPOX：8,8；vWA：15,18；
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 B類
運(yùn)輸保存：
采用干冰保存運(yùn)輸。收到細(xì)胞時(shí)，若干冰已經(jīng)*融化，請(qǐng)立即將細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng)；若尚留有干冰，請(qǐng)立即將細(xì)胞放入液氮中保存待用，請(qǐng)按條件貯存細(xì)胞，切不可將細(xì)胞置于高溫環(huán)境。
保存條件：4℃保存一年;-20℃長(zhǎng)期保存
用途：只可用于科研。
儲(chǔ)存：液氮。
運(yùn)輸：干冰(第二代培養(yǎng)末期液氮凍存)。
細(xì)胞一般2-3天更換一次培養(yǎng)基，這取決于細(xì)胞生長(zhǎng)的速度。許多細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室通常在周一，周三，周五更換培養(yǎng)基。
注意：*次植入后，在6-16小時(shí)內(nèi)更換培養(yǎng)基，以去除殘留的二甲基亞楓和死亡細(xì)胞。到達(dá)客戶手中，出現(xiàn)任何問(wèn)題（人為或者非人為），導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。對(duì)于細(xì)胞的真實(shí)性，支持客戶檢測(cè)對(duì)應(yīng)的biomarker，（如證明細(xì)胞錯(cuò)誤，全額退款。）公司針對(duì)每株細(xì)胞，鑒定gene background，鑒定完成的細(xì)胞可以提供數(shù)據(jù)，用于證明細(xì)胞的真實(shí)性，并且?guī)椭蛻舾嗟牧私饧?xì)胞特性。
操作步驟：
1. 將無(wú)菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中，將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片，待細(xì)胞長(zhǎng)至80%時(shí)取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過(guò)氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育：按照抗體說(shuō)明書(shū)稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對(duì)應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽(yáng)性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍(lán)。
10. 封片：將中性樹(shù)膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。Tth DNA 聚合酶250U
糖蛋白 PAGE 染液1套
CAS60-00-4乙二胺四 (EDTA)100g
130884-50糖蛋白蛋白純化試劑盒50 次
Z-VAD-FMK(Caspase Inhibitor)1mg
鏈霉親和素1mg
1000 μL RNase-free 藍(lán)吸頭 ( 袋裝帶芯 )1000 支
1400W(iNOS 抑制劑 )2mg
ATP 溶液，100mM0.25mL
18-0680-48脂褐質(zhì)測(cè)試盒48 T
130904-10超雜交液 (Oligo 探針 )10mL
TE 緩沖液，PH7.510mL
非凍型細(xì)菌 RNA 保存液250mL
乙基二甲基胺丙基碳化二亞胺1g
兩棲類和爬行類動(dòng)物種屬鑒定 PCR Mix100 次
CAS25389-94-0硫酸卡那霉素1g2'-HYDROXY-4',6'-DIMETHOXYACETOPHENONE4',6-二基-2-羥基乙90-24-4
N-(9-Fluorenylmethyloxycarbonyl)-N'-(2-chlorobenzyloxycarbonyl)-L-lysineFmoc-(2-芐氧基羰基)賴氨酸133970-31-7
4-Fluorophenylhydrazine hydrochloride4-肼酸823-85-8
1,4-DIOXANE-D8氚代二氧六環(huán)17647-74-4
NA柴胡油
20(R)Protopanaxdiol(R型)原人參二醇
Sodium hydrogen piperazine-1,4-diethanesulphonate1,4-嗪二乙磺酸單10010-67-0
2-FLUOROTHIOANISOLE2-茴香硫655-20-9
Methyl-5-norbornene-2,3-dicarboxylic anhydride基納迪克酸酐25134-21-8
5-Heptyl-1,3,4-oxadiazole-2(3H)-thione2-巰基-5-庚基噁二唑66473-10-7
Diethylphosphorodithioate二硫代磷酸二乙酯298-06-6
Diethyl acetylenedicarboxylate乙炔二羧酸二乙酯762-21-0
HYDROXYETHYL BETA-CYCLODEXTRIN2-羥基-Β-環(huán)糊精128446-32-2
Cadmium chloride hydrate化鎘，水合7790-78-5
RUBIDIUM銣標(biāo)準(zhǔn)溶液7440-17-7
Rhodium(III) nitrate酸銠溶液10139-58-9
4-(Trifluoromethoxy)benzenesulfonyl chloride4-(三氧基)磺酰94108-56-2
antimony triiodide三碘化銻64013-16-7
Dehydroepiandrosterone acetate醋酸去氫表雄853-23-6
Ciwujianoside B刺五加皂苷B
130888-50石蠟包埋組織蛋白提取試劑盒50 次
預(yù)混型丙烯酰胺 - 甲叉雙丙烯干粉 (19:1)100g
KT5823(PKG 抑制劑 )50μg