Cas9穩(wěn)定表達的人宮頸癌細胞；Hela-Cas9-529價格

Cas9穩(wěn)定表達的人宮頸癌細胞；Hela-Cas9-529價格質(zhì)量保證:    
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。 細胞到達客戶手中，1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導(dǎo)致細胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費再向客戶提供一次。

Cas9穩(wěn)定表達的人宮頸癌細胞；Hela-Cas9-529價格操作步驟：

1）貼壁細胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi)，吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液。控制吹打的力度，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱
形態(tài)特性  上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性  該細胞是采用慢病毒感染的方式使Hela細胞穩(wěn)定表達Cas9-Flag-Neo，經(jīng)400ug/mlG418篩選得到的單克隆，經(jīng)Western Blotting驗證該克隆可以表達Cas9蛋白，可直接用Crispr技術(shù)編輯基因組DNA。 
培養(yǎng)條件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS；400ug/ml G418
傳代方法  1:2~1:6傳代；2~3天1次。
傳代情況 C3
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法（-）
STR  Amelogenin：x,x；CSF1PO：9,10；D12S391：20,25；D13S317：13.3,13.3；D16S539：9,10；D18S51：16,16；D19S433：13,14；D21S11：27,28；D2S1338：17,17；D3S1358：15,18；D5S818：11,12；D6S1043：18,18；D7S820：8,12；D8S1179：12,13；FGA：18,21；Penta E：7,17；TH01：7,7；TPOX：8,12；vWA：16,18；
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 A類
細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時，應(yīng)將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。

核酸外切酶 T250U
CAS1214-39-76- 芐基氨基嘌呤1g
12-96LBA4404 農(nóng)桿菌菌種1mL
一管式點突變試劑盒10 次
可保種型藍白 T 載體50ng
羧甲基纖維素鹽25g
F12 培養(yǎng)基100mL
柱式植物 RNA-DNA 雙提試劑盒50 次
130821-100阿爾瑪藍細胞增殖與細胞毒檢測試劑100 次
70503R-50DNA 電泳分子量標準 (100-200 bp)50 次
生物素標記的 Oligo(dT)5μg
電泳過硫酸銨0.1gx10
apo- 轉(zhuǎn)鐵蛋白10mg
HRP 標記的抗生物素抗體10μL
CAS7558-79-4磷酸氫二500g
12-259Turbo 菌種1mL
一步式廣譜 DNAout10mL2,3-HEPTANEDIONE2,3-庚烷二1996/4/8
Tetrabutylammonium fluoride四丁基化銨429-41-4
2-(1-Piperazinyl)pyrimidine2-嗪嘧啶20980-22-7
Z-LEU-OH DCHAZ-L-亮氨酸DCHA53363-87-4
N-OCTADECYLTRICHLOROSILANE十八烷基三硅烷112-04-9
CALYCOSIN 7-O-GLUCOSIDE毛蕊異黃苷20633-67-4
Isosilybin異水飛薊賓72581-71-6
D-fructose 6-(dihydrogen phosphate)果糖-6-磷酸643-13-0
Styrene oxide氧化乙1996/9/3
Citraconic anhydride檸康酐616-02-4
ASTRAGALOSIDE I黃芪皂苷 I84680-75-1
Dextran葡聚糖9004-54-0
POLYETHYLENE, CHLORINATED化聚乙63231-66-3
Triisopentylamine三異胺645-41-0
SODIUM 2-HYDROXYBUTYRATE2-羥基丁酸5094-24-6
3,5-Dichlorophenol3,5-二酚591-35-5
NA酚紫
即用型 PCR 試劑盒 2.0 1 mL
甘油100mL
動物種屬鑒定 PCR Mix 4100 次
CAS144-48-9碘代乙酰胺5g
130891-50動物線粒體總蛋白提取劑盒50 次