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詳細(xì)介紹
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人乳腺癌細(xì)胞；MCF7-Cas9-542說(shuō)明書(shū)現(xiàn)貨直銷(xiāo)，免費(fèi)快遞送貨上門(mén)。公司供應(yīng)各種細(xì)胞株，細(xì)胞系，種類(lèi)齊全，現(xiàn)貨，質(zhì)量保證，公司所有產(chǎn)品僅供科研使用，不得用于醫(yī)學(xué)診斷。使用前仔細(xì)閱讀本說(shuō)明書(shū)。
| 產(chǎn)品名稱(chēng) | Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人乳腺癌細(xì)胞；MCF7-Cas9-542說(shuō)明書(shū) |
| 用途 | 僅用科研 |
| 保存條件 | 4℃保存一年;-20℃長(zhǎng)期保存 |
細(xì)胞名稱(chēng)
形態(tài)特性 上皮樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞是采用慢病毒感染的方式使MCF7細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)Cas9-Flag-Neo，經(jīng)400ug/mlG418篩選得到的單克隆，經(jīng)Western Blotting驗(yàn)證該克隆可以表達(dá)Cas9蛋白，可直接用Crispr技術(shù)編輯基因組DNA。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS；400ug/ml G418
傳代方法 1:3~1:6傳代；每周2~3次。
傳代情況 C3
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法（-）
STR Amelogenin：x,x；CSF1PO：10,10；D12S391：18,20；D13S317：11,11；D16S539：11,12；D18S51：14,14；D19S433：13,14；D21S11：30,30；D2S1338：21,23；D3S1358：16,16；D5S818：11,12；D6S1043：12,18；D7S820：8,9；D8S1179：10,14；FGA：23,24,25；Penta E：7,12；TH01：6,6；TPOX：9,12；vWA：14,15
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類(lèi)
運(yùn)輸保存：
采用干冰保存運(yùn)輸。收到細(xì)胞時(shí)，若干冰已經(jīng)*融化，請(qǐng)立即將細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng)；若尚留有干冰，請(qǐng)立即將細(xì)胞放入液氮中保存待用，請(qǐng)按條件貯存細(xì)胞，切不可將細(xì)胞置于高溫環(huán)境。
保存條件：4℃保存一年;-20℃長(zhǎng)期保存
用途：只可用于科研。
儲(chǔ)存：液氮。
運(yùn)輸：干冰(第二代培養(yǎng)末期液氮凍存)。
細(xì)胞一般2-3天更換一次培養(yǎng)基，這取決于細(xì)胞生長(zhǎng)的速度。許多細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室通常在周一，周三，周五更換培養(yǎng)基。
注意：*次植入后，在6-16小時(shí)內(nèi)更換培養(yǎng)基，以去除殘留的二甲基亞楓和死亡細(xì)胞。到達(dá)客戶(hù)手中，出現(xiàn)任何問(wèn)題（人為或者非人為），導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶(hù)提供一次。對(duì)于細(xì)胞的真實(shí)性，支持客戶(hù)檢測(cè)對(duì)應(yīng)的biomarker，（如證明細(xì)胞錯(cuò)誤，全額退款。）公司針對(duì)每株細(xì)胞，鑒定gene background，鑒定完成的細(xì)胞可以提供數(shù)據(jù)，用于證明細(xì)胞的真實(shí)性，并且?guī)椭蛻?hù)更多的了解細(xì)胞特性。
操作步驟：
1. 將無(wú)菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中，將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片，待細(xì)胞長(zhǎng)至80%時(shí)取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過(guò)氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育：按照抗體說(shuō)明書(shū)稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對(duì)應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周?chē)疂n吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀(guān)察，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽(yáng)性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍(lán)。
10. 封片：將中性樹(shù)膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀(guān)察?？吮芈?eTS 細(xì)菌基因組差減雜交試劑盒7次
卵清蛋白 10g
成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子5mL
DNA EDTA 2Na100g
140628-20雙染細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒（Annexin V- 熒光素 488·PI） 20 次
120654A-20 Southern DNA Marker( 生物素 )20 次
石蠟包埋組織 DNAout30 次
動(dòng)物 RNAout(TRIzol) 100mL
溴化乙錠 (EB)100mg
DNA Tween 20100mL
CAS56-87-1L- 賴(lài)氨酸25g
130532-10EGTA 溶液 ,0.5mg/mL, 蛋白10mL
柱式昆蟲(chóng) RNAout50 次
MQAE( 氯離子熒光探針 )20mg
ATP 硫酸化酶10U
血液 DNAout50 次
Rosetta(DE3)plysS 菌種1mLNA雙-（3-二基氨丙基）氨基-2-丙醇胺
BYAKANGELICOL白當(dāng)歸腦26091-79-2
4-Iodobenzonitrile對(duì)碘3058-39-7
Methyl isoeugenol異丁香酚93-16-3
Phosphorus tribromide三溴化磷7789-60-8
Sodium 4-propan-2-ylbenzenesulfonate異丙磺酸32073-22-6
Madecassic acid羥基積雪草苷18449-41-7
1-CYCLOHEXYL-3-(2-MORPHOLINOETHYL)CARBODIIMIDE METHO-P-TOLUENESULFONATE1-環(huán)已基-2-啉乙基碳二亞胺對(duì)磺酸2491-17-0
Bis(trimethylsilyl)acetylene二(三基硅烷基)乙炔14630-40-1
Bismuth nitrate pentahydrate酸鉍10035-06-0
Gentiannine秦艽素439-89-4
2-HYDROXYPROPYL ACRYLATE2-丙酸-2-羥基丙基酯999-61-1
Methyl (triphenylphosphoranylidene)acetate氧酰基亞基三基膦2605-67-6
N-FMOC-ETHANOLAMINE2-(N-芴氧羰基氨基)乙醇105496-31-9
1-Bromo-2-chloroethane1-溴-2-乙烷107-04-0
3,4,5-TRIFLUOROBENZONITRILE3,4,5-三134227-45-5
5,6,7,8-Tetrahydro-2-naphthol5,6,7,8-四氫-2-萘酚1125-78-6
DL-2-AMINOADIPIC ACIDDL-a-氨基己二酸542-32-5
Strontium phosphate磷酸鍶14414-90-5
SODIUM TETRADECYL SULFATE十四烷基磺酸1191-50-0
Arsenic砷標(biāo)準(zhǔn)溶液7440-38-2
130658-10無(wú)機(jī)焦磷酸酶 ( 酵母 )10U
120679-1006nt 隨機(jī)引物 ( 抗水解 )，0.5mM100μL
Western 印跡膜抗體清除劑200mL
過(guò)氧化氫酶10mL
DEAE 瓊脂糖凝膠 6B25mL
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