Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人乳腺癌細(xì)胞；231-Cas9-548*

Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人乳腺癌細(xì)胞；231-Cas9-548*采用干冰保存運(yùn)輸。收到細(xì)胞時(shí)，若干冰已經(jīng)*融化，請(qǐng)立即將細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng)；若尚留有干冰，請(qǐng)立即將細(xì)胞放入液氮中保存待用，請(qǐng)按條件貯存細(xì)胞，切不可將細(xì)胞置于高溫環(huán)境。

Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人乳腺癌細(xì)胞；231-Cas9-548*操作步驟：
1. 將無(wú)菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中，將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片，待細(xì)胞長(zhǎng)至80%時(shí)取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過(guò)氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育：按照抗體說(shuō)明書(shū)稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對(duì)應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周?chē)疂n吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽(yáng)性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍(lán)。
10. 封片：將中性樹(shù)膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。

Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人乳腺癌細(xì)胞；231-Cas9-548*現(xiàn)貨直銷(xiāo)，免費(fèi)快遞送貨上門(mén)。公司供應(yīng)各種細(xì)胞株，細(xì)胞系，種類(lèi)齊全，現(xiàn)貨，質(zhì)量保證，公司所有產(chǎn)品僅供科研使用，不得用于醫(yī)學(xué)診斷。使用前仔細(xì)閱讀本說(shuō)明書(shū)。

產(chǎn)品名稱(chēng)
用途	僅用科研
保存條件	4℃保存一年;-20℃長(zhǎng)期保存

細(xì)胞名稱(chēng)
形態(tài)特性  上皮樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性  該細(xì)胞是采用慢病毒感染的方式使MDA-MB-231細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)Cas9-Flag-Neo，經(jīng)400ug/mlG418篩選得到的單克隆，經(jīng)Western Blotting驗(yàn)證該克隆可以表達(dá)Cas9蛋白，可直接用Crispr技術(shù)編輯基因組DNA。 
培養(yǎng)條件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS；400ug/ml G418
傳代方法  1:2~1:4傳代；每周2~3次。
傳代情況 C3
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法（-）
STR  Amelogenin：x,x；CSF1PO：12,13；D12S391：17,18；D13S317：13,13；D16S539：12,12；D18S51：11,16；D19S433：11,14；D21S11：33.2,33.2；D2S1338：20,21；D3S1358：16,16；D5S818：12,12；D6S1043：18,18；D7S820：8,9；D8S1179：13,13；FGA：22,23；Penta E：11,11；TH01：7,9.3；TPOX：8,9；vWA：15,18；
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 A類(lèi)
運(yùn)輸保存：
采用干冰保存運(yùn)輸。收到細(xì)胞時(shí)，若干冰已經(jīng)*融化，請(qǐng)立即將細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng)；若尚留有干冰，請(qǐng)立即將細(xì)胞放入液氮中保存待用，請(qǐng)按條件貯存細(xì)胞，切不可將細(xì)胞置于高溫環(huán)境。
保存條件：4℃保存一年;-20℃長(zhǎng)期保存
用途：只可用于科研。
儲(chǔ)存：液氮。
運(yùn)輸：干冰(第二代培養(yǎng)末期液氮凍存)。
細(xì)胞一般2-3天更換一次培養(yǎng)基，這取決于細(xì)胞生長(zhǎng)的速度。許多細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室通常在周一，周三，周五更換培養(yǎng)基。
注意：*次植入后，在6-16小時(shí)內(nèi)更換培養(yǎng)基，以去除殘留的二甲基亞楓和死亡細(xì)胞。到達(dá)客戶(hù)手中，出現(xiàn)任何問(wèn)題（人為或者非人為），導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶(hù)提供一次。對(duì)于細(xì)胞的真實(shí)性，支持客戶(hù)檢測(cè)對(duì)應(yīng)的biomarker，（如證明細(xì)胞錯(cuò)誤，全額退款。）公司針對(duì)每株細(xì)胞，鑒定gene background，鑒定完成的細(xì)胞可以提供數(shù)據(jù)，用于證明細(xì)胞的真實(shí)性，并且?guī)椭蛻?hù)更多的了解細(xì)胞特性。

131222-100咪唑溶液，2M100mL
柱式細(xì)菌 RNAout50 次
磷脂酶 A21mg
玉米蛋白25g
1000 μL RNase-free 藍(lán)吸頭 ( 袋裝 )1000 支
CAS9010-66-6玉米蛋白25g
130570-1000植物 Actin 小鼠單抗1000μL
3060-250非凍型組織 RNA 保存液250mL
咪唑10g
200μLRNase-free 黃吸頭 ( 盒裝已滅菌帶芯 )96 支
糞便 DNAout30 次
醛基磁珠2mL
D005-1DNA Oligo 合成服務(wù)1 base
130558-10Rosetta(DE3)pLysS 感受態(tài)細(xì)胞0.1mL×10
小鼠抗 SUMO 標(biāo)簽蛋白單抗100μL
甲叉雙丙烯酰胺25g
阿利新藍(lán) 8GX1g
NcoI200U
干粉型 TB 培養(yǎng)基250g
23-0220-5Decitabine 地西他濱5mg
60912-1.5非酶 RNA 清除劑 2.01.5mLGALLIUM(III) NITRATE HYDRATE酸鎵69365-72-6
2,5-Dihydro-1H-pyrrole hydrochloride2,5-二氫吡咯酸63468-63-3
Neoandrographolide穿心蓮新苷27215-14-1
S-Methyl-L-cysteineS-基-L-半胱氨酸1187-84-4
1,3-Dimethoxybenzene間二151-10-0
H-ALA-2-CLTRT RESINH-ALA-2-CHLOROTRITYL RESIN
3-Methyl-3-methoxybutanol3-氧基-3-基丁醇56539-66-3
L-Rhamnose monohydrate鼠李糖6155-35-7
CIS-5-NORBORNENE-EXO-2,3-DICARBOXYLIC ANHYDRIDE順-5-降冰片-外型-2,3-二酸酐2746-19-2
Tetraallyltin四丙基錫7393-43-3
1,1-DICHLOROETHANE1,1-二乙烷75-34-3
Succinonitrile丁二110-61-2
H-D-Glu-OBzl1-芐基 D-谷氨酸酯79338-14-0
DL-TyrosineDL-酪氨酸556-03-6
Semisolid Nurient Ag半固體營(yíng)養(yǎng)瓊脂
Sodium 2,4-dichlorophenoxyacetate2,4-二氧乙酸2702-72-9
(HEPTADECAFLUORO-1,1,2,2-TETRAHYDRODECYL)TRIMETHOXYSILANE十七癸基三氧基硅烷83048-65-1
(S)-(-)-Methyl 2-chloropropionate(S)-(-)-2-丙酸酯73246-45-4
1,4-Dioxane1,4-二氧六環(huán)123-91-1