Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人乳腺癌細(xì)胞；231-Cas9-552*

Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人乳腺癌細(xì)胞；231-Cas9-552*采用干冰保存運(yùn)輸。收到細(xì)胞時，若干冰已經(jīng)*融化，請立即將細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng)；若尚留有干冰，請立即將細(xì)胞放入液氮中保存待用，請按條件貯存細(xì)胞，切不可將細(xì)胞置于高溫環(huán)境。

Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人乳腺癌細(xì)胞；231-Cas9-552*操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中，將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片，待細(xì)胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍(lán)。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。

Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人乳腺癌細(xì)胞；231-Cas9-552*現(xiàn)貨直銷，免費(fèi)快遞送貨上門。公司供應(yīng)各種細(xì)胞株，細(xì)胞系，種類齊全，現(xiàn)貨，質(zhì)量保證，公司所有產(chǎn)品僅供科研使用，不得用于醫(yī)學(xué)診斷。使用前仔細(xì)閱讀本說明書。

產(chǎn)品名稱
用途	僅用科研
保存條件	4℃保存一年;-20℃長期保存

細(xì)胞名稱
形態(tài)特性  上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性  該細(xì)胞是采用慢病毒感染的方式使MDA-MB-231細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)Cas9-Flag-Puromycin，經(jīng)2ug/ml嘌呤霉素篩選得到的單克隆，經(jīng)Western Blotting驗證該克隆可以表達(dá)Cas9蛋白，可直接用Crispr技術(shù)編輯基因組DNA。 
培養(yǎng)條件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS；2ug/ml Puromycin
傳代方法  1:2~1:4傳代；每周2~3次。
傳代情況 C3
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法（-）
STR  Amelogenin：x,x；CSF1PO：12,13；D12S391：17,18；D13S317：13,13；D16S539：12,12；D18S51：11,16；D19S433：11,14；D21S11：30,33.2；D2S1338：20,21；D3S1358：16,16；D5S818：12,12；D6S1043：18,18；D7S820：8,9；D8S1179：13,13；FGA：22,23；Penta E：11,11；TH01：7,9.3；TPOX：8,9,13；vWA：15,18；
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 A類
運(yùn)輸保存：
采用干冰保存運(yùn)輸。收到細(xì)胞時，若干冰已經(jīng)*融化，請立即將細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng)；若尚留有干冰，請立即將細(xì)胞放入液氮中保存待用，請按條件貯存細(xì)胞，切不可將細(xì)胞置于高溫環(huán)境。
保存條件：4℃保存一年;-20℃長期保存
用途：只可用于科研。
儲存：液氮。
運(yùn)輸：干冰(第二代培養(yǎng)末期液氮凍存)。
細(xì)胞一般2-3天更換一次培養(yǎng)基，這取決于細(xì)胞生長的速度。許多細(xì)胞培養(yǎng)實驗室通常在周一，周三，周五更換培養(yǎng)基。
注意：*次植入后，在6-16小時內(nèi)更換培養(yǎng)基，以去除殘留的二甲基亞楓和死亡細(xì)胞。到達(dá)客戶手中，出現(xiàn)任何問題（人為或者非人為），導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。對于細(xì)胞的真實性，支持客戶檢測對應(yīng)的biomarker，（如證明細(xì)胞錯誤，全額退款。）公司針對每株細(xì)胞，鑒定gene background，鑒定完成的細(xì)胞可以提供數(shù)據(jù)，用于證明細(xì)胞的真實性，并且?guī)椭蛻舾嗟牧私饧?xì)胞特性。

氯化血紅素1g
抑肽酶2mg
堿性磷酸酶測試劑盒48 T
CAS9002-09-9酪氨酸脫羧酶25U
100807-100杜氏 PBS 緩沖液 ,10×100mL
130843-50分枝桿菌 RNAout50 次
萘啶酮酸5g
8- 環(huán)戊基 -1,3- 二丙基黃嘌呤25mg
Congo Red 100mg
蝸牛酶干粉5g
22-0160-100DAF-FM DA(NO 熒光探針 )100 次
17- μL RNase-free 藍(lán)吸頭 ( 盒裝 )100 支
葡激酶100μg
百萬堿基真菌 DNAout10 次
Sodium Butyrate(HDAC 抑制劑 )1g
末端脫氧核苷轉(zhuǎn)移酶 (TdT)500U
23-0740-1Spermidine.trihvdrochloride(nNOS 抑制劑 )1g
60707-250細(xì)菌 DNAout250 次
RNase-free Tris HCl,1M,pH 8.5100mL
超敏化學(xué)發(fā)光（HRP）檢測試劑盒 2.0 250mL
RNase-free DTT 溶液 ,1M10mL
鹽酸萬古霉素溶液 ,50mg/mL10mL
18-0110-50NF-κB 激活－核轉(zhuǎn)運(yùn)檢測試劑盒50 次
101208-100DNA  Tris HCl，1M，pH9.0100mLEthyl pyruvate丙酸乙酯617-35-6
Sodium 3-(pyridin-2-yl)-1,2,4-triazine-5,6-diyl]bis(benzene-4,4'-sulphonate) hydrate菲啰嗪69898-45-9
ISOSTEARIC ACID異硬脂酸2724-58-5
(ETHYLENEDINITRILO)TETRAACETIC ACID, TRISODIUM SALT HYDRATE乙四乙酸三85715-60-2
Dimethyl fumarate富馬酸二酯624-49-7
GADOLINIUM金屬釓7440-54-2
DI-T-BUTYLCYCLOHEXYLPHOSPHINECyclohexyldi - T型丁基膦436865-11-1
N,N-DIETHYL-P-PHENYLENEDIAMINE SULFATE二乙基對硫酸6065-27-6
N-ACETYLMURAMIC ACIDN-乙酰胞壁酸10597-89-4
2-Bromo-2',4'-difluoroacetophenoneα-溴代-2,4-二乙102429-07-2
1-Hydroxy-2,3-dimethylbenzene2,3-二酚526-75-0
Octanoyl chloride酰111-64-8
2-Phenylacetoacetonitrile2-基乙?；?468-48-8
2-Amino-4-chloro-5-methylbenzenesulfonic acid2-氨基-4--5-基磺酸88-51-7
11-(1-Piperazinyl)-dibenzo[b,f][1,4]thiazepine dihydrochloride11-嗪-二并[b,f][1,4]硫氮雜卓酸111974-74-4
L(-)-Camphorsulfonic acidL-(-)樟腦磺酸35963-20-3
(S)-(+)-3,3-Dimethyl-2-butylamine(S)-3,3-二基-2-丁胺22526-47-2
Secondary carbon primary amine extraction agent仲碳伯胺萃取劑
Gabapentin-lactam3,3'-亞基-4-丁內(nèi)酰胺64744-50-9
L-Methionine methyl ester hydrochlorideL-蛋氨酸酯酸2491-18-1