Cas9穩(wěn)定表達的人胰腺癌細胞；PANC-1-Cas9-554說明書

Cas9穩(wěn)定表達的人胰腺癌細胞；PANC-1-Cas9-554說明書現(xiàn)貨直銷，免費快遞送貨上門。公司供應(yīng)各種細胞株，細胞系，種類齊全，現(xiàn)貨，質(zhì)量保證，公司所有產(chǎn)品僅供科研使用，不得用于醫(yī)學診斷。使用前仔細閱讀本說明書。

細胞名稱
形態(tài)特性  上皮樣；多角形
生長特性 貼壁生長
特征特性  該細胞是采用慢病毒感染的方式使PANC-1細胞穩(wěn)定表達Cas9-Flag-Neo，經(jīng)400ug/mlG418篩選得到的單克隆，經(jīng)Western Blotting驗證該克隆可以表達Cas9蛋白，可直接用Crispr技術(shù)編輯基因組DNA。 
培養(yǎng)條件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS；400ug/ml G418
傳代方法  1:2~1:4傳代；每周2~3次。
傳代情況 C3
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法（-）
STR  Amelogenin：x,x；CSF1PO：10,12；D12S391：22,22；D13S317：11,11；D16S539：11,11；D18S51：12,12；D19S433：11,16；D21S11：28,28；D2S1338：23,24；D3S1358：17,17；D5S818：11,13；D6S1043：11,12；D7S820：8,10；D8S1179：14,15；FGA：21,21；；Penta E：7,14；TH01：7,8；TPOX：8,11；vWA：15,15；
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 A類
運輸保存：
采用干冰保存運輸。收到細胞時，若干冰已經(jīng)*融化，請立即將細胞復蘇培養(yǎng)；若尚留有干冰，請立即將細胞放入液氮中保存待用，請按條件貯存細胞，切不可將細胞置于高溫環(huán)境。
保存條件：4℃保存一年;-20℃長期保存
用途：只可用于科研。
儲存：液氮。
運輸：干冰(第二代培養(yǎng)末期液氮凍存)。
細胞一般2-3天更換一次培養(yǎng)基，這取決于細胞生長的速度。許多細胞培養(yǎng)實驗室通常在周一，周三，周五更換培養(yǎng)基。
注意：*次植入后，在6-16小時內(nèi)更換培養(yǎng)基，以去除殘留的二甲基亞楓和死亡細胞。到達客戶手中，出現(xiàn)任何問題（人為或者非人為），導致細胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費再向客戶提供一次。對于細胞的真實性，支持客戶檢測對應(yīng)的biomarker，（如證明細胞錯誤，全額退款。）公司針對每株細胞，鑒定gene background，鑒定完成的細胞可以提供數(shù)據(jù)，用于證明細胞的真實性，并且?guī)椭蛻舾嗟牧私饧毎匦浴?br />操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。CAS103-47-92-( 環(huán)己胺基 ) 乙烷磺酸5g
140384-10GV3101 農(nóng)桿菌感受態(tài)細胞10×100μL
新生霉素溶液 ,50mg/mL5mL
核酸內(nèi)切酶 VIII1000U
N- 苯甲酰 -L- 酪氨酸乙酯1g
β- 乙醇，蛋白10mL
CAS9001-40-5葡萄糖 -6- 磷酸脫氫酶1000U
100820-250干粉型 LB-Lennox 培養(yǎng)基250g
一站式蛋白質(zhì)非變性 PAGE 套裝 ( 高 pH)30 次
剪切式勻漿機1臺
氯化乙酰膽堿1g
AMPPD100mg
CAS224967-52-6次甲基綠1g
120534-20兔抗 GST 標簽多抗20μL
支氣道上皮細胞生長因子5mL
快流速 DEAE- 瓊脂糖凝膠25mL
硫酸銨100g
GV3101 農(nóng)桿菌感受態(tài)細胞10×100μL
CAS13292-46-1利福平250mg
131053-5DTT，蛋白5g
柱式微生物基因組 DNAout 50 次2-Naphthalenethiol2-萘硫酚91-60-1
3,4-Dibromothiophene3,4-二溴噻吩3141-26-2
Hydroxypropyl cellulose羥丙基纖維素9004-64-2
Artemether蒿71963-77-4
EUGENOL ACETATE乙酸丁香酚酯93-28-7
Glucose-13C葡萄糖－13C
2-Chlorobutane代仲丁烷78-86-4
2,5-dioxo-1,4-cyclohexanedicarboxylic acid dimethyl ester2,5-二氧酰基-1,4-環(huán)己二6289-46-9
Benzyl 2-bromoacetate2-溴乙酸芐酯5437-45-6
OXINE-COPPER8-羥基喹啉銅13014-03-4
Polymyxin B sulfate硫酸多粘菌素B1405-20-5
Molybdenum trioxide三氧化鉬1313-27-5
3-Methylbenzyl cyanide間基乙2947-60-6
Hydroxypropyl methyl cellulose羥丙基基纖維素9004-65-3
DL-HistidineDL-組氨酸4998-57-6
POLYISOBUTYLENE聚異丁9003-27-4
4,4'-Dimethyldiphenylsulfoxide4,4'-二亞砜1774-35-2
Tangeretin桔皮素481-53-8
Aprotinin抑肽酶9087-70-1
2,2,2-Trichloroacetamide2,2,2-三乙酰胺594-65-0