Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人卵巢腺癌細(xì)胞；SK-OV-3-Cas9-562價(jià)格

Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人卵巢腺癌細(xì)胞；SK-OV-3-Cas9-562價(jià)格售后：收到細(xì)胞后7天，如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有質(zhì)量問題（如污染，死亡，快遞運(yùn)輸?shù)仍颍r(shí)，應(yīng)出具書面質(zhì)量問題報(bào)告并及時(shí)傳真致銷售人員，我們將盡快為您解決。

Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人卵巢腺癌細(xì)胞；SK-OV-3-Cas9-562價(jià)格質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測(cè)，100%進(jìn)口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。

Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人卵巢腺癌細(xì)胞；SK-OV-3-Cas9-562價(jià)格操作步驟：

1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱
形態(tài)特性  上皮樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性  該細(xì)胞是采用慢病毒感染的方式使SK-OV-3細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)Cas9-Flag-Neo，經(jīng)400ug/mlG418篩選得到的單克隆，經(jīng)Western Blotting驗(yàn)證該克隆可以表達(dá)Cas9蛋白，可直接用Crispr技術(shù)編輯基因組DNA。 
培養(yǎng)條件  McCoy's 5A Media (Modified with Tricine)  10%FBS；400ug/ml G418
傳代方法  1:2~1:6傳代；每周2~3次。
傳代情況 C3
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法（-）
STR  Amelogenin：x,x；CSF1PO：11,11；D12S391：22,22；D13S317：8,11；D16S539：12,12；D18S51：16,17,18；D19S433：14,14.2；D21S11：30,31,31.2；D2S1338：18,23；D3S1358：14,14；D5S818：11,11；D6S1043：12,12；D7S820：13,14；D8S1179：14,15；FGA：24,26；Penta E：5,13；TH01：9,9.3；TPOX：8,11；vWA：17,19；
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。

鎳柱介質(zhì)2mL
90306B-100胰酶消化液 ( 無 EDTA)100mL
130845-50柱式分枝桿菌 RNAout50 次
腦心浸液500g
8- 氧代鳥嘌呤 DNA 糖基化酶80U
DAF-FM DA(NO 熒光探針 )100 次
地高標(biāo)記 dUTP 溶液25μL
22-0200-5Di-8-ANEPPS5mg
120656-1剪切式勻漿機(jī)1臺(tái)
葡聚糖 T-200010g
半乳糖氧化酶150U
Spermidine.trihvdrochloride(nNOS 抑制劑 )1g
蝦堿性磷酸酶300U
23-0770-2TLR4 激活劑2mL
80927A-4大提柱式細(xì)菌 DNAout4次
RNase-free 水1mL
超微量 ATP 酶測(cè)試盒 ( 測(cè) Ca2+ATPase)25 T黑化大家鼠肺成纖維樣細(xì)胞英文名稱：NRL1
RL1(大鼠肺成纖維樣細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
HCC94(人子宮鱗細(xì)胞（高分化）)5×106cells/瓶×2
BL瓊脂培養(yǎng)基/BL Medium雙岐桿菌分離培養(yǎng)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
馬丁肉湯1萬毫升/袋國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
HLF-a(人肺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
長(zhǎng)尾綠猴胚胎細(xì)胞英文名稱：4179
人腺細(xì)胞英文名稱：HCC1937
泛酸測(cè)定培養(yǎng)基/Pantothenic Acid Assay Medium嬰兒食品和粉中泛酸測(cè)定250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞（低分化）英文名稱：PC-12（低分化）
厭氧菌瓊脂/GAM瓊脂/Anaerobic Agar用于梭菌和其他厭氧菌的分離培養(yǎng)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
P19(小鼠畸胎瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2gersion
NR8383(大鼠肺泡巨噬細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
FRhK-4(恒河猴胚腎細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
小鼠肝細(xì)胞英文名稱：H22
DG-18瓊脂/Dichloranglycerol Agar食品中霉菌和酵母菌分離培養(yǎng)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
CaEs-17, 人食管細(xì)胞株
HCCLM3(人高轉(zhuǎn)移肝細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
BGS瓊脂/BGS Agar沙門氏菌分離培養(yǎng)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
卵磷脂（蛋黃）/蛋黃軟磷脂/磷脂酰膽堿/蛋黃卵磷脂/磷脂蛋黃素/Lecithin from egg yolkBR10克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
HPAC(人胰腺腺泡上)5×106cells/瓶×2
正常人結(jié)腸組織細(xì)胞英文名稱：CCD-18Co
人腺細(xì)胞英文名稱：MDA-MB-231
通用洗柱液250mL
凝血酶1000U
18-0140-25超微量 ATP 酶測(cè)試盒 (Na+K+、Ca2+Mg2+ATPase)25 T
101211-100DNA  EDTA 2Na100g
Stbl3 感受態(tài)細(xì)胞0.1 mL×10
DNA 電泳分子量標(biāo)準(zhǔn) (200-5000 bp)50 次