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詳細(xì)介紹
人乳腺導(dǎo)管瘤細(xì)胞；BT-474價格質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進(jìn)口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
人乳腺導(dǎo)管瘤細(xì)胞；BT-474價格操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。
【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱
形態(tài)特性 上皮樣；圓形、成團(tuán)
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細(xì)胞系由Lasfargues E和 Coutinho WG建立，源于一名60歲患有浸潤性乳腺導(dǎo)管癌的白人女性的實(shí)體瘤。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 新生牛血清，10%；10ug/ml 人重組insulin
傳代方法
傳代情況
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法（-）
STR Amelogenin:X；CSF1PO:10,11；D13S317:11；D16S539:9,11；D18S51:13,18；D21S11:28,32.2；D3S1358:17；D5S818:11,13；D7S820:9,12；D8S1179:10,12；FGA:22,25；PentaD:9,14；PentaE:5；TH01:7；TPOX:8；vWA:15,16
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
乳酸脫氫酶測試盒24 T
碘硝基四唑紫嘌呤250mg
ABTS 溶液，7mM 50mL
100806-100Earle 溶液100mL
SPQ(6- 甲氧基 -N-(3- 磺丙基 ) 喹啉 )25mg
鹽酸萬古霉素100mg
DNA Tris Base( 三羥甲基氨基甲烷 )100g
CAS9002-13-5脲酶 ( 尿素酶 巨豆 )20Ku
18-0590-48維生素 C 測試盒48 T
纖維蛋白原100mg
丁酰膽堿酯酶500U
血液保存和 DNA 純化套裝100 次大鼠骨骼肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
MTT細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒規(guī)格：500次gersion
BT-20(人腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
UBA培養(yǎng)基/UBA Medium啤酒中厭氧菌檢測250克國產(chǎn)/進(jìn)口
衛(wèi)矛醇半固體瓊脂/Dulcitol Semisolid Agar細(xì)菌衛(wèi)矛醇發(fā)酵試驗(yàn)10克國產(chǎn)/進(jìn)口
S-180(小鼠肉瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
小鼠肝細(xì)胞英文名稱：H22
人肺腺細(xì)胞（胸膜滲出液）英文名稱：Calu-3
T/G HA－VSMC(人血管平滑肌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
IV型膠原酶(含100mL酶解緩沖液)10mL
吳茱萸堿規(guī)格：1g/支；98%
枸櫞酸鹽培養(yǎng)基/檸檬酸鹽培養(yǎng)基/Citrate Agar大腸桿菌和產(chǎn)氣桿菌的鑒別250克國產(chǎn)/進(jìn)口
SK-NEP-1(人腎母細(xì)胞瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
EAC(小鼠艾氏腹水細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
人胰島β細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
非洲綠猴SV40 轉(zhuǎn)化的腎細(xì)胞英文名稱：COS-7
QGY-7701, 人肝細(xì)胞gersion
GoldCassette-HIS/HIS重組標(biāo)簽蛋白快速檢測試劑盒(精裝)2次2次、10次
EF-18瓊脂/EF-18 Agar濾膜法檢測食品中沙門氏菌250克國產(chǎn)/進(jìn)口
SK-MES-1(人肺鱗細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
SW626(人卵巢細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
LLC-WRC 256(大鼠腹水細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
293(人胚腎細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
130808-1顯影粉1袋
甲基纖維素25g
非酶多糖清除劑 (DNA )50 次
C43(DE3) 菌種1mL
小鼠抗 S1 標(biāo)簽單抗100μL
60208-10硫酸卡那霉素溶液 ,50mg/mL10mL
Nicotinamide(Sirt1 抑制劑 )10g
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