人髓樣甲狀腺腫瘤細(xì)胞；TT圖片

人髓樣甲狀腺腫瘤細(xì)胞；TT圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱 人髓樣甲狀腺腫瘤細(xì)胞；TT圖片
形態(tài)特性  上皮細(xì)胞
生長特性 貼壁生長
特征特性  TT細(xì)胞由77歲女性甲狀腺髓質(zhì)癌患者的穿刺活檢樣本中建立。 TT細(xì)胞持續(xù)產(chǎn)生高水平的降血鈣素和CEA。 在更換培養(yǎng)基后24小時和72小時在培養(yǎng)基中檢測到的免疫活性的降血鈣素濃度分別為3900 pg/百萬細(xì)胞和7700 pg/百萬細(xì)胞。 72小時后CEA積累濃度超過27 ng/百萬細(xì)胞。  
培養(yǎng)條件  F12K  優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%
傳代方法  消化5-10分鐘。1:2。一周后可再傳。
傳代情況 P(31+5)
凍存條件  *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR 
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進(jìn)口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。   細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

8- 羥基喹啉5g
Rosetta 菌種1mL
140385-10LBA4404 農(nóng)桿菌感受態(tài)細(xì)胞10×100μL
磷酸化蛋白富集試劑盒10 次
即用型熒光定量 RT-PCR 試劑盒300 次
DNA 磷酸化試劑盒20 次
接頭 DNA(BamH I(Bgl II)-Sma I)5nmol
70704A-10預(yù)染蛋白質(zhì)電泳分子量標(biāo)準(zhǔn) (14.4-97.4KD)10 次
RNase-free Tris HCl,1M,pH 6.5100mL
土壤 RNAout50 次
CAS67-56-1甲醇500mL
130624-25009° N DNA 連接酶2500U
111208B-5植物線粒體純化試劑盒 ( 精提 )5次
兔肌動蛋白1mg
氯化膽堿100g
一站式長效期 SDS-PAGE 電泳套裝 (2-30KD)30 次
120668C-10.5mL DNA 離心超濾管 (90-150 KD)1個
還原劑兼容型 BCA 蛋白定量試劑盒250 次
2-(N- 嗎啡啉 ) 乙磺酸10gSDS-PAGE Loading Buffer (還原，5x)10ml國產(chǎn)
Hep 3B(人肝細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
3.5% NaC1葡萄糖磷酸鹽胨水發(fā)酵管BR20支國產(chǎn)/進(jìn)口
李氏菌選擇性培養(yǎng)基基礎(chǔ)/改良McBride瓊脂培養(yǎng)基/MMA基礎(chǔ)/Modified Mcbride Agar Base單增李氏菌選擇性分離250克國產(chǎn)/進(jìn)口
MFC-GFP(小鼠前胃細(xì)胞(綠色熒光蛋白標(biāo)記))5×106cells/瓶×2
22RV1(人前列腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
人腎管狀上細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞（低分化）英文名稱：PC-12（低分化）
NC膜(0.45um)30cm × 3m，15cm x 20cm15cm x 20cmgersion
COLO 205(人結(jié)腸細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
NLN培養(yǎng)基(含維生素)/NLN Medium with vitaminsBR10升國產(chǎn)/進(jìn)口
肉浸液瓊脂/Meat Infusion Agar一般細(xì)菌培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進(jìn)口
BC-019(人腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
COS-1(非洲綠猴SV40轉(zhuǎn)化的腎細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
小鼠Ⅱ型肺泡上細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
M17肉湯/M17 Broth牛奶和制品中酸菌檢測和分離培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進(jìn)口
人非小細(xì)胞肺細(xì)胞英文名稱：HCC827
尿素酶瓊脂基礎(chǔ)/尿素瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ)/Urease Agar Base細(xì)菌脲酶檢測，腸桿菌鑒別250克國產(chǎn)/進(jìn)口
T24, 人膀胱細(xì)胞
胰蛋白胨500g
克必隆 eTS 抑制性差減雜交 PCR 試劑盒10 次
12-7MDS 42recA trfA 菌種1mL
綠如藍(lán)染料，PCR 0.1mL
鹽酸四環(huán)素干粉1g