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詳細(xì)介紹
人食管癌細(xì)胞；TE-11圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱 人食管癌細(xì)胞；TE-11圖片
形態(tài)特性 上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 胎牛血清，10%
傳代方法 消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。
傳代情況 PN
凍存條件 *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進(jìn)口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。
一站式 His 標(biāo)記蛋白質(zhì)微量純化套裝20 次
Western 印跡膜封膜液 ( 尼龍膜 )100mL
碘代乙酰胺5g
Tris 緩沖鹽溶液 (TBS)10 包
101103B-1玻璃勻漿器 ,2mL1套
SP6 體外轉(zhuǎn)錄試劑盒50 次
可溶性兩性 B25mg
DNA 電泳分子量標(biāo)準(zhǔn) (300-10000 bp)50 次
Ac-LEHD-FMK(Caspase9Inhibitor)20μL
Rosetta(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞0.1mL×10
30-100常用PCR引物100uL
Lambda 核酸外切酶1000U
PDTC(NF-κB 抑制劑 / 抗氧化劑 )1g
17-0120MboI500U
一站式 SDS-PAGE 電泳套裝30 次
130544-5AEBSF 溶液，10mg/mL5mL
兔抗山羊 IgG(H+L)，辣根過氧化物酶標(biāo)記100 μL
維生素 D31gYeast Protein Extraction Kit/酵母蛋白抽提試劑盒25次、100次國產(chǎn)
MDA-MB-231（ATCC來源）, 人腺細(xì)胞
Ammonium Persulfate(APS)20g國產(chǎn)
純化瓊脂粉/寒天/瓊脂/洋菜/石花菜/瓊膠/AgarBR，強(qiáng)度400g/c㎡250克國產(chǎn)/進(jìn)口
亞硫酸鹽瓊脂/Sulfite Agar厭氧亞硫酸鹽還原桿菌試管計(jì)數(shù)250克國產(chǎn)/進(jìn)口
MDA-MB-435S(人腺導(dǎo)管細(xì)胞)5×106cells/瓶×2gersion
BT-549(人腺管細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
BCIP/NBT堿性磷酸酶顯色試劑40ml國產(chǎn)
人咽鱗細(xì)胞英文名稱：FaDu
TMP瓊脂培養(yǎng)基/TMP Agar金黃色葡萄球菌的分離培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進(jìn)口
四環(huán)素檢定瓊脂/Tetracyline Examination Agar副溶血性弧菌的選擇性分離培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進(jìn)口
TE-1(人食管細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
HEC-1-A(人子宮內(nèi)膜腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
小鼠卵巢上細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
3% NaC1V-P半固體發(fā)酵管BR20支國產(chǎn)/進(jìn)口
人卵巢細(xì)胞英文名稱：HO-8910
ZR-75-1(人腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
MDA-MB-231, 人腺細(xì)胞gersion
Ana-1(小鼠巨噬細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
長效期 SDS-PAGE 電泳液 ( 干粉 )(>30KD)20L
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