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詳細(xì)介紹
人結(jié)腸癌轉(zhuǎn)基因細(xì)胞；RKO-E6價格質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達客戶手中，1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
人結(jié)腸癌轉(zhuǎn)基因細(xì)胞；RKO-E6價格操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。
【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱
形態(tài)特性 上皮細(xì)胞
生長特性 貼壁生長
特征特性 RKO-E6細(xì)胞系是用脂質(zhì)體法轉(zhuǎn)染pCMV-E6的結(jié)腸癌RKO細(xì)胞系。 該細(xì)胞含有穩(wěn)定整合受控於巨細(xì)胞病毒啟動子的人乳狀病毒（HPV）E6癌基因。 RKO-E6細(xì)胞系和它的母系RKO一起可用于研究p53缺失引起的細(xì)胞參數(shù)改變p53介導(dǎo)的轉(zhuǎn)錄和凋亡等。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%
傳代方法 消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。
傳代情況 PN5
凍存條件 *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
130590-100小鼠抗 HPC4 標(biāo)簽蛋白單抗100μL
Poly r(A)100mg
一步法96 孔板單菌落質(zhì)粒DNAout( 離心法)5次
10 μL RNase-free 白吸頭 ( 盒裝已滅菌 )96 支
魚類種屬鑒定 PCR Mix100 次
22-0450-100MEQ，(6- 甲氧 -N- 乙基喹啉碘 )100mg
T4 DNA 連接酶1000U
羧芐青1g
CAS9001-12-1膠原酶Ⅱ型100mg
130519-2磁珠 2mL
微量蛋白沉淀試劑盒50 次
生物素化蛋白 A1mg
0.5mL DNA 離心超濾管 (9-15 KD)1個倉鼠卵巢細(xì)胞英文名稱：Lec1
NEC(人食管細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
MN-c, 小鼠質(zhì)神經(jīng)元gersion
CHL(倉鼠肺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
人心房肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
大鼠子宮成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
Poly-D-lysine溶液規(guī)格：2mggersion
G1(發(fā)綠色熒光的小鼠胚胎干細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
HE瓊脂/Hektoen瓊脂培養(yǎng)基/腸道病菌培養(yǎng)用瓊脂/Hektoen Enteric Agar用于沙門氏菌屬和志賀菌屬的分離培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進口
牛津瓊脂基礎(chǔ)/OXA基礎(chǔ)/Oxford Agar Base單增李氏菌的選擇性分離250克國產(chǎn)/進口
A3(人T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
小鼠胃細(xì)胞英文名稱：MFC
人胚腎細(xì)胞英文名稱：AAV-293
大鼠肝細(xì)胞英文名稱：CBRH-7919
Molt-4/急性淋巴母細(xì)胞白血病細(xì)胞株國產(chǎn)gersion
BGC823(人胃細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
WS瓊脂/Wuhan Salmonella Agar分離沙門氏菌和志賀氏菌用250克國產(chǎn)/進口
戊烷脒多粘菌素B瓊脂基礎(chǔ)炭疽桿菌的培養(yǎng)及初步鑒定250克國產(chǎn)/進口
QGY-7701(人肝細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
小鼠肺細(xì)胞英文名稱：LLC
人肺大動脈內(nèi)細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
SW 1353(人骨肉瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
III型膠原酶(含100mL酶解緩沖液)10mL
人淋巴細(xì)胞分離液 1.077200mL
131129E-100植物種屬鑒定 PCR Mix 5100 次
L- 酪氨酸25g
L-Arginine(NO 前體 )5g
Southern Marker Oligo(DIG)20 次
Earle 溶液100mL
80814-200Bradford 法蛋白定量試劑盒200mL
葡萄糖 -6- 磷酸脫氫酶測試盒24 T
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