人肝癌細(xì)胞；Hep G2說明書

人肝癌細(xì)胞；Hep G2說明書采用干冰保存運(yùn)輸。收到細(xì)胞時(shí)，若干冰已經(jīng)*融化，請(qǐng)立即將細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng)；若尚留有干冰，請(qǐng)立即將細(xì)胞放入液氮中保存待用，請(qǐng)按條件貯存細(xì)胞，切不可將細(xì)胞置于高溫環(huán)境。

人人肝癌細(xì)胞；Hep G2說明書現(xiàn)貨直銷，免費(fèi)快遞送貨上門。公司供應(yīng)各種細(xì)胞株，細(xì)胞系，種類齊全，現(xiàn)貨，質(zhì)量保證，公司所有產(chǎn)品僅供科研使用，不得用于醫(yī)學(xué)診斷。使用前仔細(xì)閱讀本說明書。

產(chǎn)品名稱	人肝癌細(xì)胞；Hep G2說明書
用途	僅用科研
保存條件	4℃保存一年;-20℃長(zhǎng)期保存

細(xì)胞名稱
形態(tài)特性  上皮細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性  該細(xì)胞來源于一名15歲的白人少年的肝癌組織。該細(xì)胞表達(dá)甲胎蛋白、白蛋白、α-2-巨球蛋白、α-1-抗胰蛋白酶、轉(zhuǎn)鐵蛋白、α-1-抗凝乳蛋白酶、結(jié)合珠蛋白、銅藍(lán)蛋白、纖溶酶原、補(bǔ)體C4、C3激活物、纖維蛋白原、α-1酸性糖蛋白、α-2-HS-糖蛋白、β-脂蛋白、視黃醇結(jié)合蛋白；表達(dá)胰島素受體和胰島素樣生長(zhǎng)因子IGFⅡ的受體；該細(xì)胞具有3-羥基-3-甲酰輔酶A還原酶和肝甘油三酯脂肪酶的活性。目前尚未證明該細(xì)胞中有HBV基因組。 
培養(yǎng)條件  MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS
傳代方法  1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C76
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR 
同工酶 同工酶鑒定
染色體 
使用權(quán)限 A類
運(yùn)輸保存：
采用干冰保存運(yùn)輸。收到細(xì)胞時(shí)，若干冰已經(jīng)*融化，請(qǐng)立即將細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng)；若尚留有干冰，請(qǐng)立即將細(xì)胞放入液氮中保存待用，請(qǐng)按條件貯存細(xì)胞，切不可將細(xì)胞置于高溫環(huán)境。
保存條件：4℃保存一年;-20℃長(zhǎng)期保存
用途：只可用于科研。
儲(chǔ)存：液氮。
運(yùn)輸：干冰(第二代培養(yǎng)末期液氮凍存)。
細(xì)胞一般2-3天更換一次培養(yǎng)基，這取決于細(xì)胞生長(zhǎng)的速度。許多細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室通常在周一，周三，周五更換培養(yǎng)基。
注意：*次植入后，在6-16小時(shí)內(nèi)更換培養(yǎng)基，以去除殘留的二甲基亞楓和死亡細(xì)胞。到達(dá)客戶手中，出現(xiàn)任何問題（人為或者非人為），導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。對(duì)于細(xì)胞的真實(shí)性，支持客戶檢測(cè)對(duì)應(yīng)的biomarker，（如證明細(xì)胞錯(cuò)誤，全額退款。）公司針對(duì)每株細(xì)胞，鑒定gene background，鑒定完成的細(xì)胞可以提供數(shù)據(jù)，用于證明細(xì)胞的真實(shí)性，并且?guī)椭蛻舾嗟牧私饧?xì)胞特性。
操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中，將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片，待細(xì)胞長(zhǎng)至80%時(shí)取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對(duì)應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍(lán)。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。23-0690-1SNP(NO 供體 )1g
130946-10柱式昆蟲 mtDNAout，測(cè)序10 次
RNase-free SDS 溶液 ,10%100mL
超快轉(zhuǎn)染試劑盒1mL
RNase-free 75% 乙醇250mL
青霉素 G 鹽溶液10mL
18-0060-50GSH—PX 測(cè)試盒50 T
101203-100DNA  Tris HCl，1M，pH6.5100mL
Spermidine.trihvdrochloride(nNOS 抑制劑 )1g
DNA 包被溶液100mL
DNA PAGE 膠回收試劑盒100 次
K802 菌種1mL
131132-100Poly r(A)100mg
120668G-14mL DNA 離心超濾管 (30-50 KD)1個(gè)
四鹽酸精胺1g
大提柱式土壤 DNAout4次
大提無內(nèi)毒素質(zhì)粒 DNAout10 次
Origami B(DE3)plysS 感受態(tài)細(xì)胞 0.1mL×10
17-0210SacI500U
131117-100DNA 包被溶液100mL
痰液采集器1個(gè)
多聚甲醛 - 磷酸緩沖固定液250 mL
RNA  PVP K30( 聚乙烯基吡咯烷酮 K30) 100g
m7G(5′)ppp(5′)G 帽結(jié)構(gòu)類似物25 OD
沉淀型 TMB 顯色試劑盒100mL
Taq 酶抗體250U
130579-1000小鼠抗 MBP 標(biāo)簽單抗1000μL
PCR 優(yōu)化試劑盒1套
動(dòng)物 RNAout(TRIzol) 250mL
D/F12 培養(yǎng)基100mL
咪唑溶液，2M100mL
22-0280-100DiOC6(3) 碘化物100mg
髓核細(xì)胞生長(zhǎng)因子5mL
硫酸鏈霉素5g
CAS9000-88-8D- 氨基酸氧化酶5 mg
23-0230-100Doxorubicin(Adriamycin) 阿霉素100μL
100832-250四氮唑藍(lán) (NBT)250mg
一步法單菌落質(zhì)粒 DNAout50 次
甲苯胺藍(lán)5g
天凈沙鎳柱原位再生試劑盒20 次
131128B-100動(dòng)物種屬鑒定 PCR Mix 2100 次
L- 半胱氨酸25g
氨甲喋呤10mg
青霉素 G 鹽1Mu
M13mp18DNA10μg
131071-1牛血清 γ 球蛋白標(biāo)準(zhǔn)品，2mg/mL1mL
葡聚糖50g