人涎腺腺樣囊性癌細胞；ACC-2圖片

人涎腺腺樣囊性癌細胞；ACC-2圖片【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 人涎腺腺樣囊性癌細胞；ACC-2圖片
形態(tài)特性  上皮細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性  1968年建系，源自一位28歲男性腺樣囊性癌患者，人腭部小涎腺腺樣囊性癌組織小塊靜置培養(yǎng)7天細胞開始生長，*傳代50天，BALB/C,CBA,Swiss，DF裸小鼠皮下移植成瘤，表達角蛋白。 
培養(yǎng)條件  MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS
傳代方法  1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C120
凍存條件  基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR  STR鑒定
同工酶 
染色體 
使用權限 A類
細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時，應將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
質(zhì)量保證:    
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。   細胞到達客戶手中，1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導致細胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi)，吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液。控制吹打的力度，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

酶水解酪素100g
氨芐青5mg
RNA  DEPC ( 焦碳酸二乙酯 )10mL
EGY48 酵母菌種1mL
130984-1.5DNase I 溶液1.5mL
101114-50通用型 RT-LAMP 試劑盒50 次
微量樣品核酸提取試劑盒200 次
HinfI 2000U
堿性品紅5g
DB3.1 感受態(tài)細胞10×100μL
CAS68-19-9維生素 B121g
21-0030-5 成纖維細胞生長因子 -25mL
120810-25血液線粒體和核 DNA 雙提試劑盒 25 次
R- 藻紅蛋白標記親和素1mg
DEAE 交換介質(zhì)50mL
96 孔板 PCR 片段純化回收試劑盒 ( 離心法 )5次
人源脫嘌呤 / 脫嘧啶 (AP) 核酸內(nèi)切酶激酶1000U
CAS150-25-4N ,N- 雙 (2- 羥乙基 ) 甘氨酸10g
12-154GS115 酵母菌種1mL
一管式植物 DNAout50 次
可溶性淀粉100g
葡聚糖 T-7010gp19miRNA 檢測試劑盒 50 次
130871-20一站式 MBP 標簽蛋白純化套裝20 次
柱式軟體動物 DNAout50 次
一管式病毒 DNA-RNAout50 次
放線菌素 D1mg
大提柱式酵母 DNAout4次
22-0130-100Congo Red 100mg
蘇丹Ⅲ5g
章魚堿25mg
YPD 液體培養(yǎng)基100mL
天凈沙甲基化 PCR 2.0 試劑盒150 次
130643-500烷基嘌呤 DNA 糖基化酶500U
葉酸5g
葡聚糖凝膠 G-1025g
新生霉素溶液 ,50mg/mL5mL
120626-0.25UTP 溶液，100mM0.25mL
Red-Tth DNA 聚合酶250U
MnCl2溶液，25mM，PCR 5mL
D- 果糖 -6- 磷酸二100mg
柱式葡萄球菌 RNAout50 次