詳細介紹
人T淋巴瘤細胞;HUT 102*操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中,將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應(yīng)的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染:用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側(cè),再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),以免產(chǎn)生氣泡,封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
人T淋巴瘤細胞;HUT 102*現(xiàn)貨直銷,免費快遞送貨上門。公司供應(yīng)各種細胞株,細胞系,種類齊全,現(xiàn)貨,質(zhì)量保證,公司所有產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于醫(yī)學(xué)診斷。使用前仔細閱讀本說明書。
產(chǎn)品名稱 | |
用途 | 僅用科研 |
保存條件 | 4℃保存一年;-20℃長期保存 |
細胞名稱
形態(tài)特性 淋巴母細胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性 HUT 102是一株T細胞淋巴瘤細胞系。該細胞具有成熟T細胞系的特征,細胞表面呈現(xiàn)IL-2活性,E花環(huán)陽性,表面免疫球蛋白、EBV核抗原和TdT(Terminal deoxyribonucleotidyl-transferase)反應(yīng)陰性。該細胞系還可釋放與T細胞淋巴瘤相關(guān)的單一C型逆轉(zhuǎn)病毒(retrovirus),即HTLVI病毒。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR STR鑒定
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
運輸保存:
采用干冰保存運輸。收到細胞時,若干冰已經(jīng)*融化,請立即將細胞復(fù)蘇培養(yǎng);若尚留有干冰,請立即將細胞放入液氮中保存待用,請按條件貯存細胞,切不可將細胞置于高溫環(huán)境。
保存條件:4℃保存一年;-20℃長期保存
用途:只可用于科研。
儲存:液氮。
運輸:干冰(第二代培養(yǎng)末期液氮凍存)。
細胞一般2-3天更換一次培養(yǎng)基,這取決于細胞生長的速度。許多細胞培養(yǎng)實驗室通常在周一,周三,周五更換培養(yǎng)基。
注意:*次植入后,在6-16小時內(nèi)更換培養(yǎng)基,以去除殘留的二甲基亞楓和死亡細胞。到達客戶手中,出現(xiàn)任何問題(人為或者非人為),導(dǎo)致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。對于細胞的真實性,支持客戶檢測對應(yīng)的biomarker,(如證明細胞錯誤,全額退款。)公司針對每株細胞,鑒定gene background,鑒定完成的細胞可以提供數(shù)據(jù),用于證明細胞的真實性,并且?guī)椭蛻舾嗟牧私饧毎匦浴?/p>
山羊抗小鼠 IgG(H+L),異硫氰酸熒光素標(biāo)記1000 μL
CAS1303-96-4四硼酸,十水100g
81214-50Tricine-SDS-PAGE 陽極電泳液 ( 干粉 )50L
總谷胱甘肽檢測試劑盒100 次
綠如藍蛋白染液250 次
肝素1g
蛋白去除試劑 S3g
CAS9068-59-1中性蛋白酶10mg
140598-100山羊抗小鼠 IgG(H+L),異硫氰酸熒光素標(biāo)記100 μL
80903-5大提柱式植物 RNAout5次
NcoI200U
5(6)-CFDA100mg
雪旺細胞生長因子5mL
IPTG 干粉2.5g
21-0450-5周細胞生長因子5mL
17-004-100010 μL RNase-free 白吸頭 ( 袋裝 )1000 支
Protein A 瓊脂糖1mL
BL21-CodonPlus-RP 菌種1mL
NS-398(COX-2 抑制劑 )1mg
動物線粒體純化試劑盒 ( 粗提 )15 次
23-0570-100Paclitaxel(TAXOL)( 紫杉醇 )100μL
70901-50柱式真菌 DNAout50 次羥脯氨酸測試盒 ( 消化法 )( 測培養(yǎng)細胞、培養(yǎng)液 )48 T
增強型 DAB 顯色試劑盒100mL
CAS556-50-3甘氨酸二肽10g
101121-50柱式軟骨 RNAout50 次
Di-8-ANEPPS5mg
溶菌酶1g
一站式動物 mRNAout25 次
玻璃珠法柱式真菌 DNAout50 次
100211-2500TAE 電泳液 ,50×2500mL
干粉型 2×YT 培養(yǎng)基250g
酚 - 混合液 (DNA 提取 )100mL
23-0410-0.5Lipoic acid( 抗氧化劑 )0.5g
111008-50非酶多糖清除劑 (DNA )50 次
90318-50柱式 DNA 清除劑50 次
藍膠瓊脂糖5mL
重組蛋白(病毒)系列--
120414-100DNA 拓撲異構(gòu)酶 I100U
胰蛋白酶 1:25025g
4- 甲基傘形酮10g