人肝癌細胞；SMMC-7721價格

人肝癌細胞；SMMC-7721價格質量保證:    
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。 細胞到達客戶手中，1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導致細胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費再向客戶提供一次。

人肝癌細胞；SMMC-7721價格操作步驟：

1）貼壁細胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi)，吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱
形態(tài)特性  上皮細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性  取人肝癌組織，采用靜置和旋轉管法培養(yǎng)11天細胞開始生長，*傳代23天。AFP陽性。用Northern blot方法，未能檢測到細胞中1.3kb LFIRE-1/HFREP-1 mRNA的表達，免疫缺陷小鼠體內(nèi)可成瘤。 
培養(yǎng)條件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS
傳代方法  1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C65
凍存條件  基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR 
同工酶 同工酶鑒定
染色體 
使用權限 A類
細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時，應將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。

雙染細胞凋亡檢測試劑盒（Annexin V-FITC·PI）50 次
大片段 DNA 分子量標準50μg
TE 緩沖液，PH7.510mL
His 標簽蛋白蛋白酶抑制劑10mL
17-0010ApaI2000U
121114B-5天凈沙非同位素探針雜交試劑盒5次
Tris 緩沖鹽溶液 (TBS)10 包
動物種屬鑒定 PCR Mix 6100 次
隨機引物法 DNA 探針標記試劑盒5次
熱敏磷酸酶500U
D009-1ABI 高通量 DNA 測序1次
91106A-50T7 體外轉錄試劑盒50 次
維生素 B110g
克必隆常態(tài)轉化液20 次
弗氏*佐劑10mL
肝細胞生長因子5mL
DNA  PVP K30( 聚乙烯基吡咯烷酮 K30)100g
140631-20雙染細胞凋亡檢測試劑盒（Annexin V- 熒光素 647·7-AAD）20 次
120654E-20Southern Marker Oligo( 生物素 )20 次
石蠟油，PCR 10mL
動物細胞核蛋白微量制備試劑盒25 次
羥基脲1gT7 體外轉錄試劑盒50 次
L- 羥基脯氨酸5g
CAS9064-47-5核酸組蛋白 ( 小牛胸 )250mg
101107-100DNA  CTAB 溶液，20%100mL
GAL 指示劑培養(yǎng)基100mL
糖原Ⅱ型1g
十六烷基*基溴化銨25g
分子雜交爐1臺
131130G-100真菌種屬鑒定 PCR Mix 7100 次
L- 異亮氨酸25g
Nocodazole( 有絲分裂抑制劑 )5mg
17-0040DpnI500U
90507-10BL21(DE3)pLysS 化學感受態(tài)細胞0.1mL×10
130906-10超雜交液 ( 原位雜交 )10mL
親和層析柱3 mL
Tricine-SDS-PAGE 陰極電泳液 ( 干粉 )10L
CAS593-84-0異硫氰酸胍25g
101113-50柱式軟體 RNAout50 次
Dihydrorhodamine 123 10mg
RNase-free CTAB 溶液 ,20%100mL
F12K 培養(yǎng)基 ( 含 1% 雙抗 )500mL
DNA 鹽酸胍溶液，8M100mL
3150-100RNA 電泳液 ,10×100mL