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詳細(xì)介紹
人涎腺癌細(xì)胞；ACC-M圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱 人涎腺癌細(xì)胞；ACC-M圖片
形態(tài)特性 上皮細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 ACC-M細(xì)胞是ACC-2細(xì)胞系經(jīng)體內(nèi)外不斷選擇獲得的肺轉(zhuǎn)移細(xì)胞株（ACC-2不形成肺轉(zhuǎn)移），其裸鼠體內(nèi)肺轉(zhuǎn)移率達(dá)96%。該細(xì)胞株除保留了上皮和腺源性的特性外，體外生長(zhǎng)能力大大增強(qiáng)。已證明該細(xì)胞株是建立肺高轉(zhuǎn)移性裸鼠模型的材料。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C97
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR STR鑒定
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購(gòu)買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè)，100%進(jìn)口來(lái)源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。
DNA 尿素 -PAGE 上樣液10mL
21-0350-5 神經(jīng)元生長(zhǎng)因子5mL
90611-100RNA GuSCN( 異硫氰酸胍 )100g
PMSF 溶液，10mg/mL5mL
BL21 SI 菌種1mL
Lovastatin(HMG-CoA Reductase 抑制劑 )10mg
DNA 電泳分子量標(biāo)準(zhǔn) (2)（50-400 bp）50 次
23-0470-1Metformin(LKB1-AMPK 激活劑 )1g
60805-20中草藥 DNAout20 次
RNA Sarkosyl( 月桂酰 -N- 甲基氨基 ) 100g
Cyanine 5-NHS Ester12x50nm
DNA 粘轉(zhuǎn)平試劑盒20 次
15mL DNA 離心超濾管 (90-150 KD)1個(gè)
140644-20Caspase 1 檢測(cè)試劑盒 20 次
60408-50通用洗柱液50mL
SNP(NO 供體 )1g
DiBAC4(3)25mg
miRNA 尿素 -PAGE 上樣液 ,6×10mL
BS168 枯草宿主菌菌種1mL
100204-1一站式 PCR-SSCP 套裝1套
131188-1彩色 Acryl 助沉劑1g
雙染細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒（Annexin V-APC·7-AAD） 20 次
dTTP 溶液，100mM0.5mL柱式動(dòng)物 RNAout250 次
CAS999-81-5矮壯素100g
柱式細(xì)菌 DNAout( 含溶菌酶 )50 次
TMRE25mg
人重組 TFIIB50gsu
庚烷磺酸1g
CAS85-86-9蘇丹Ⅲ5g
101101-30線狀 DNA 清除劑30 次
多粘菌素 B 硫酸鹽100mg
dNTP 和引物清除劑100 次
PRMI1640 培養(yǎng)基 ( 含 10% 胎牛血清 )100mL
Lillie 甲醛中性固定液250 mL
130818-0.1鏈霉親和素，HRP 標(biāo)記0.1mL
抑氨肽酶，5mg/mL5mL
6- 芐基氨基嘌呤1g
JM107 菌種1mL
140379-10Rosetta 感受態(tài)細(xì)胞10×100μL
130556-10Origami B(DE3)plysS 感受態(tài)細(xì)胞 0.1mL×10
100405-100SSC 溶液 ,20×100mL
上皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子5mL
3- 苯甲酰丙酸5g
CAS334-50-9亞精胺三鹽酸鹽1g
130942-10百萬(wàn)堿基真菌 DNAout10 次
多酚氧化酶 ( 菌菇 )25KU
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