詳細介紹
人喉表皮樣癌細胞;HEp-2-NS1價格質量保證:
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產品全部經過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內,活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。 細胞到達客戶手中,1個月內出現任何問題,導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
人喉表皮樣癌細胞;HEp-2-NS1價格操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液??刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱
形態(tài)特性 上皮細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞屬專利保藏,其特征特性尚未公開。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權限 未定
細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
H-89(PKA 抑制劑 )1mg
RNA DTT ( 二硫代蘇糖醇 )10g
23-0330-18Insulin18mg
80102-50柱式糞便 DNAout50 次
RIPA 裂解液 ( 強 )100mL
ConA 糖蛋白分離試劑盒10 次
DNA 電泳分子量標準 (3)λ/EcoR I+ Hind III50 次
MAL 指示劑培養(yǎng)基100mL
CAS38183-12-9熒光胺25mg
140652-1親和層析柱30 mL
真菌種屬鑒定 PCR Mix 1100 次
鄰聯茴香胺1g
2,6- 二氯酚靛酚1g人重組激活基因1(RAG-1)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人幽門螺旋菌IgG(Hp-IgG)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人血小板衍生生長因子BB(PDGF-BB)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人血管活性腸肽(VIP)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人細胞角蛋白20(CK-20)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人糖原磷酸化酶(GP)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人生長抑素(SS)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人娠特異性β1糖蛋白(SP1/PSβ1-G)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人凝血因子Ⅱ(FⅡ)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人麥角蛋白IgA(Gliadin-IgA)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人酪氨酸羥化酶(TH)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人抗心磷脂抗體IgA(ACA-IgA)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人抗甲型肝炎毒IgG抗體(anti-HAV)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人巨噬細胞炎性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人基質裂解素(ST2)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人果糖1,6二磷酸醛縮酶(FDA)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人鈣網蛋白(CRT)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人凋亡蛋白酶激活因子1(ICAD)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
isplatin(DNA 交聯劑 / 細胞凋亡誘導劑 )50mg
Southern Marker Oligo( 生物素 )20 次
100922-50亞硫酸氫鹽 DNA 修飾試劑盒50 次
120644-100聚乙二醇100g
*0 化學感受態(tài)細胞0.1mL×10