詳細介紹
人脛骨肉瘤細胞;U-2 OS價格質(zhì)量保證:
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。 細胞到達客戶手中,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
人脛骨肉瘤細胞;U-2 OS價格操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液??刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a(chǎn)生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱
形態(tài)特性 上皮細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞是1964年從一位15歲女性肉瘤患者的脛骨中分離出來的,適合做轉(zhuǎn)染宿主
培養(yǎng)條件 McCoy's 5A Media (Modified with Tricine) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 PN5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR AMEL:X,X;CSF1PO:13,13;D12S391:19,20;D13S317:13,13;D16S539:11,12;D18S51:14,14;D19S433:15,15;D21S11:31,31;D2S1338:20,24;D2S441:10,14;D3S1358:16,16;D5S818:11,11;D6S1043:11,11;D7S820:11,12;D8S1179:12,14;FGA:20,20;Penta D:9,9;Penta E:10,13;TH01:6,9.3;TPOX:11,1
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應(yīng)將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
140389-10Y187 酵母感受態(tài)細胞10×100μL
溴酚藍5g
核酸稀釋液,測 OD 100mL
葡聚糖凝膠 G-75 中顆粒25g
鈷柱介質(zhì)10mL
CAS1405-41-0硫酸慶大500mg
100825-200自誘導(dǎo)培養(yǎng)基 (lac 啟動子 )200mL
一站式生物素 TUNEL 試劑盒 (FITC/POD)10 次
堿性磷酸酶,牛小腸500U
琥珀酸,六水25g
驢抗山羊 IgG,堿性磷酸酶標(biāo)記60μL
CAS617-04-9甲基 α-D- 吡喃甘露糖苷25g
130574-100小鼠抗 Flag 標(biāo)簽單抗100μL
脂褐質(zhì)測試盒48 T
L- 氨基酸氧化酶2mg
卵磷脂 ( 大豆 )25g
Y187 酵母感受態(tài)細胞10×100μL
CAS69-72-7水楊酸25g
131222-100咪唑溶液,2M100mL
柱式細菌 RNAout50 次
磷脂酶 A21mg
玉米蛋白25g
1000 μL RNase-free 藍吸頭 ( 袋裝 )1000 支
CAS9010-66-6玉米蛋白25g
130570-1000植物 Actin 小鼠單抗1000μL人α-銀環(huán)蛇毒素(α-BGT)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
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人25-羥基維生素D(25-OH Vitamin D)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
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大鼠過敏毒素/補體片斷4a(C4a)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白1(LRP-1)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝