人肝內(nèi)膽管癌細(xì)胞系；LICCF圖片

人肝內(nèi)膽管癌細(xì)胞系；LICCF圖片售后：收到細(xì)胞后7天，如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有質(zhì)量問(wèn)題（如污染，死亡，快遞運(yùn)輸?shù)仍颍r(shí)，應(yīng)出具書面質(zhì)量問(wèn)題報(bào)告并及時(shí)傳真致銷售人員，我們將盡快為您解決。

人肝內(nèi)膽管癌細(xì)胞系；LICCF圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱 人肝內(nèi)膽管癌細(xì)胞系；LICCF圖片
形態(tài)特性  上皮樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性  該細(xì)胞屬專利保藏，其特征特性尚未公開(kāi)。 
培養(yǎng)條件  MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS
傳代方法  1:3傳代，3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR 
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 未定
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購(gòu)買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè)，100%進(jìn)口來(lái)源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。   細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

組蛋白25g
氯化銨 T5g
葡聚糖凝膠 G-50 中顆粒25g
過(guò)氧化氫測(cè)試盒50 T
CAS9001-78-9堿性磷酸酶 ( 大腸桿菌 )5mg
111007-500MALDI 蛋白樣品處理試劑盒500 次
60305-50真菌 RNAout50 次
Nocodazole( 有絲分裂抑制劑 )5mg
5-FITC1g
5-Carboxyfluorescein100mg
一站式長(zhǎng)效期 SDS-PAGE 電泳套裝 (>30KD)30 次
22-0060-100Acridine Orange(AO)100mg
17-011-9610 μL RNase-free 白吸頭 ( 盒裝已滅菌長(zhǎng)尖 )96 支
Pyrrolidinedithioca rbamin acid.ammonium salt(NF-kB 抑制劑 / 抗氧化劑 )5mg
Bst DNA 聚合酶，大片段800U
Pifithrin-a(p53 抑制劑 )5mg
超敏化學(xué)發(fā)光 (HRP) 檢測(cè)試劑盒（ECL）250mL
23-0640-100Rapamycin(FRAP/mTOR 抑制劑 )100μg 
131206-4大提柱式酵母 DNAout4次植物維生素A(VA)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2(TGFβ2)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠氧化型高密度脂蛋白(ox-HDL）ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠細(xì)胞色素C(Cyt-C)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠生長(zhǎng)因子(GH)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠凝血酶抗凝血酶復(fù)合物(TAT)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠抗血小板抗體IgG/M/A(PA-IgG/M/A)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(HGF)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠補(bǔ)體片段3b受體(C3bR)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠β2微球蛋白(BMG/β2-MG)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠15-脂氧合酶（15-LOX）ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
兔子腎上腺髓質(zhì)素(ADM)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
兔子白介素10(IL-10)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
兔環(huán)磷酸腺苷(cAMP)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2(TGFβ2)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人游離脂肪酸(FFA)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人氧還原蛋白過(guò)氧化物酶4(PRDX4)Elisa試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
RNase-free CTAB 溶液 ,20%100mL
超快非醇核酸沉淀劑30 次
真菌 RNAout50 次
絲裂 C 溶液 ,5mg/mL10mL