詳細(xì)介紹
人肝癌細(xì)胞株;Huh-7/M8*操作步驟:
1. 將無(wú)菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中,將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片,待細(xì)胞長(zhǎng)至80%時(shí)取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過(guò)氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育:按照抗體說(shuō)明書(shū)稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對(duì)應(yīng)的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽(yáng)性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染:用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍(lán)。
10. 封片:將中性樹(shù)膠滴在爬片一側(cè),再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),以免產(chǎn)生氣泡,封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
人肝癌細(xì)胞株;Huh-7/M8*現(xiàn)貨直銷,免費(fèi)快遞送貨上門(mén)。公司供應(yīng)各種細(xì)胞株,細(xì)胞系,種類齊全,現(xiàn)貨,質(zhì)量保證,公司所有產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于醫(yī)學(xué)診斷。使用前仔細(xì)閱讀本說(shuō)明書(shū)。
產(chǎn)品名稱 | |
用途 | 僅用科研 |
保存條件 | 4℃保存一年;-20℃長(zhǎng)期保存 |
細(xì)胞名稱
形態(tài)特性 上皮樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞屬專利保藏,其特征特性尚未公開(kāi)。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 未定
運(yùn)輸保存:
采用干冰保存運(yùn)輸。收到細(xì)胞時(shí),若干冰已經(jīng)*融化,請(qǐng)立即將細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng);若尚留有干冰,請(qǐng)立即將細(xì)胞放入液氮中保存待用,請(qǐng)按條件貯存細(xì)胞,切不可將細(xì)胞置于高溫環(huán)境。
保存條件:4℃保存一年;-20℃長(zhǎng)期保存
用途:只可用于科研。
儲(chǔ)存:液氮。
運(yùn)輸:干冰(第二代培養(yǎng)末期液氮凍存)。
細(xì)胞一般2-3天更換一次培養(yǎng)基,這取決于細(xì)胞生長(zhǎng)的速度。許多細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室通常在周一,周三,周五更換培養(yǎng)基。
注意:*次植入后,在6-16小時(shí)內(nèi)更換培養(yǎng)基,以去除殘留的二甲基亞楓和死亡細(xì)胞。到達(dá)客戶手中,出現(xiàn)任何問(wèn)題(人為或者非人為),導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。對(duì)于細(xì)胞的真實(shí)性,支持客戶檢測(cè)對(duì)應(yīng)的biomarker,(如證明細(xì)胞錯(cuò)誤,全額退款。)公司針對(duì)每株細(xì)胞,鑒定gene background,鑒定完成的細(xì)胞可以提供數(shù)據(jù),用于證明細(xì)胞的真實(shí)性,并且?guī)椭蛻舾嗟牧私饧?xì)胞特性。
22-0010-1005(6)-CFDA100mg
17-006-100010 μL RNase-free 白吸頭 ( 袋裝帶芯 )1000 支
Protein G 磁珠1mL
Bouin 固定液250 mL
Okadaic acid 鹽 (PP1 和 PP2A 抑制劑 )10μg
植物線粒體純化試劑盒 ( 粗提 )5次
23-0590-1PDTC(NF-κB 抑制劑 / 抗氧化劑 )1g
100303-50玻璃珠法柱式真菌 DNAout50 次
RNase 抑制劑 ( 人源 )2500U
超雜交液 (Oligo 探針 )10mL
硫酸鏈溶液 ,50mg/mL10mL
細(xì)胞松弛素 B 溶液 ,20mg/mL0.1mL
131013-1ATP 溶液,1mM1mL
130502-50無(wú)內(nèi)毒素水50mL人嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白Eotaxin 2(Eotaxin 2/CCL24)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人乳頭瘤毒18(HPV-18)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人皮質(zhì)醇(Cortisol)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人免疫球蛋白G Fc段受體Ⅱ(FcγRⅡ/CD32)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人利什曼原蟲(chóng)抗體(Leishimaria Ab)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人抗乙型肝炎毒核心抗體(HBcAb)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人抗巨細(xì)胞毒抗體IgG(anti-CMV IgG)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人抗BP180抗體(BP180-Ab)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人己糖激酶(HK)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人核因子-κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人甘露糖凝集素受體(MBLR)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人對(duì)氧磷酶ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人促胰液素/分泌素受體(SR)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人丙酮酸激酶(PK)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人白介素2可溶性受體β鏈(IL-2sRβ )ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人β2整合素(integrin β2/CD11+CD18)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人L選擇素(L-Selectin/CD62L)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
Southern 真菌 DNAout10 次
DMEM 培養(yǎng)基 ( 高糖 )100mL
一步法單菌落質(zhì)粒 DNAout50 次
DH5αλpir 菌種1mL
130409-1克必隆 eTS PCR 產(chǎn)物差減雜交試劑盒1套