詳細(xì)介紹
過表達(dá)CADM1的骨肉瘤細(xì)胞株;U-2os-CADM1價格質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進(jìn)口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
過表達(dá)CADM1的骨肉瘤細(xì)胞株;U-2os-CADM1價格操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱
形態(tài)特性 上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細(xì)胞屬專利保藏,其特征特性尚未公開。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 未定
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時,應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
總 SOD 活性檢測試劑盒 (NBT 法 )100 次
驢抗山羊 IgG,辣根過氧化物酶標(biāo)記60μL
鏈霉蛋白酶 E250mg
超氧化物歧化酶測試盒48 T
CAS9003-99-0乳酸過氧化物酶10mg
131160-0.1山羊抗小鼠 IgG,異硫氰酸熒光素標(biāo)記0.1mg
3080-250植物 RNAout250 次
NAC( 抗氧化劑 )2g
5- 溴 -4- 氯 -3- 吲哚基磷 (BCIP)100mg
心肌細(xì)胞生長因子5mL
SDS 溶液 ,10%,電泳100mL
21-0420-5雪旺細(xì)胞生長因子5mL
17-001-10000.5 mL RNase-free 離心管1000 支
PRMI1640 培養(yǎng)基100mL
BL21(DE3)菌種1mL
Nicotinamide(Sirt1 抑制劑 )10g
非凍型血液 RNA 保存液100mL人丙酮酸脫氫酶E1(PDH E1)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人白介素3(IL-3)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人β半乳糖苷酶(βGAL)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人NK細(xì)胞ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
犬血栓素B2(TXB2)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
牛乳糖合成酶(LS)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
裸鼠克拉拉細(xì)胞蛋白(CC16) ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
雞傳染性貧血毒(CIAV)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
鮭魚補(bǔ)體蛋白3(C3)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠脂多糖(LPS)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠血清總補(bǔ)體(CH50)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠維生素A(VA)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠免疫球蛋白M(IgM)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠紅細(xì)胞生成素(EPO)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠多巴胺(DA)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠白三烯C4(LTC4)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠P21蛋白(P21)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
23-0540-1NS-398(COX-2 抑制劑 )1mg
100919-100消解酶 ( 溶細(xì)胞酶 ) 干粉100mg
RNAi,RNA 干擾載體及基因片段等系列2 μg
常用PCR引物100uL