詳細(xì)介紹
抗乙酰膽堿受體小鼠雜交瘤細(xì)胞;6c7c圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱 抗乙酰膽堿受體小鼠雜交瘤細(xì)胞;6c7c圖片
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 半貼壁生長(zhǎng)
特征特性 可產(chǎn)生單克隆抗體,抗原為乙酰膽堿受體。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 保持細(xì)胞密度在1×105~1×106 cells/ml之間,每周換液2~3次
傳代情況 不詳
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR -
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購(gòu)買到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè),100%進(jìn)口來(lái)源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
75|cis-Diamminedichloroplatinum; (SP-4-2)-diamminedichloro-platinum
JNJ-10397049 (1 mg)N-(2,4-dibromophenyl)-N’-[(4S,5S)-2,2-dimethyl-4-phenyl-1,3-dioxan-5-yl]-urea
Calpeptin (25 mg)N-[(1S)-1-[[[(1S)-1-formylpentyl]amino]carbonyl]-3-methylbutyl]-carbamic acid, phenylmethyl ester
Neutrophil Elastase Inhibitor (5 mg)1-(3-methylbenzoyl)-1H-indazole-3-carbonitrile
Boldenone Cypionate (10 mg)17β-hydroxy-androsta-1,4-dien-3-one cyclopentanepropionate
Disulfiram (50 g)NSC 25953|Tetraethylthiuram disulfide; N,N,N’,N’-tetraethyl-thioperoxydicarbonic diamide
EGFR Inhibitor (5 mg)Epidermal Growth Factor Receptor Inhibitor; N-[3-[[6-[[3-(trifluoromethyl)phenyl]amino]-4-pyrimidinyl]amino]phenyl]-cyclopropanecarboxamide
Budesonide (100 mg)Entocort|Pulmicort; 16α,
JWH 019 N-(3-fluorohexyl) isomer (1 mg)JWH 019 N-(3-fluorohexyl) analog; (1-(3-fluorohexyl)-1H-indol-3-yl)(naphthalen-1-yl)methanone點(diǎn)擊大鼠腎足突細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒大鼠腎足突細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒試劑盒試劑盒詢價(jià) 元
WHB-15WHB 離心管15ml錐形離心管(泡沫架裝),USP VI級(jí),滅菌50個(gè)/包,1600個(gè)/箱詢價(jià) 元
WHB-BCB175培養(yǎng)瓶175cm2培養(yǎng)瓶,600ml,密封蓋,滅菌ps5個(gè)/包,40個(gè)/箱詢價(jià) 元
WHB-DP96-SF-1硅膠片96圓孔硅膠片硅膠10片/包, 100片/箱詢價(jià) 元
WHB-PD7培養(yǎng)皿7cm培養(yǎng)皿高15mm滅菌18只/包,630只/箱詢價(jià) 元
HUM- iCell -d003食管上皮細(xì)胞1×1063642 元5×1066724 元
HUM- iCell -n012神經(jīng)星形膠質(zhì)細(xì)胞1×1063596 元5×1066987 元
HUM-iCell-a003支氣管上皮細(xì)胞1×1064698 元5×1068980 元
MIC- iCell -d012胰腺星狀細(xì)胞1×1062594 元5×1064596 元
RAT- iCell -b004主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞1×1062562 元5×1064875 元
RAT- iCell -u004腎小管上皮細(xì)胞1×1062562 元5×1064875 元
HIMCL-052THP-1人急性單核細(xì)胞白血病細(xì)胞1×1061ml/T75850 元
MGCL-001U14小鼠子宮頸癌細(xì)胞1×1061ml/T751400 元
HDCL-029NCI-H716人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞1×1061ml/T751250 元
HGACL-019MDA-MB-468-06人乳腺癌細(xì)胞1×1061ml/T751500 元
HIMCL-018人淋巴細(xì)胞1×1061ml/T751500 元
HMCL-019actin binding protein, 1B肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白1B單抗雜交瘤細(xì)胞1×1061ml/T751500 元
HRCL-060人肺癌細(xì)胞1×1061ml/T751500 元
ICL-034Yak-2白耗牛皮膚細(xì)胞1×1061ml/T751500 元
Methoxphenidine (hydrochloride) (1 mg)2-MeO-Diphenidine|MXP; 1-(1-(2-methoxyphenyl)-2-phenylethyl)piperidine, monohydrochloride
Dobutamine (hydrochloride) (10 mg)Dobutrex|Inotrex|NSC 299583; 4-[2-[[3-(4-hydroxyphenyl)-1-methylpropyl]amino]ethyl]-1,2-benzenediol, monohydrochloride
Loratadine (10 mg)Claritin|SCH 29851; 4-(8-chloro-5,6-dihydro-11H-benzo[5,6]cyclohepta[1,2-b]pyridin-11-ylidene)-ethyl ester-1-piperidinecarboxylic acid