小鼠巨噬細胞；Ana-1圖片

小鼠巨噬細胞；Ana-1圖片【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 小鼠巨噬細胞；Ana-1圖片
形態(tài)特性 
生長特性 懸浮生長
特征特性   
培養(yǎng)條件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  胎牛血清，10%
傳代方法  1:2。3天內(nèi)可長滿。
傳代情況 PN
凍存條件  *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR 
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 A類
細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時，應(yīng)將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
質(zhì)量保證:    
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。   細胞到達客戶手中，1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導(dǎo)致細胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi)，吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

NVP-231 （10 mg）N-[2-（benzoylamino）-6-benzothiazolyl]-tricyclo[3。3。1。13，7]decane-1-carboxamide； NVP-231
IWP-2-V2 （5 mg）N-（6-methyl-2-benzothiazolyl）-2-[[3，4，6，7-tetrahydro-4-oxo-3-（phenylmethyl）thieno[3，2-d]pyrimidin-2-yl]thio]-acetamide； Inhibitor of Wnt Production-2-V2； IWP-2-V2
4-acetoxy DMT （hydrochloride） （5 mg）3-[2-（dimethylamino）ethyl]-1H-indol-4-ol-4-acetate， monohydrochloride； 4-AcO DMT|4-acetoxy-N，N-Dimethyltryptamine； 4-acetoxy DMT （hydrochloride）
Fludarabine （25 mg）9-β-D-arabinofuranosyl-2-fluoro-9H-purin-6-amine； F-ara-A|NSC 118218； Fludarabine
D-NMMA （acetate） （25 mg）N5-[imino（methylamino）methyl]-D-ornithine， monoacetate； D-NG-monomethyl Arginine acetate； D-NMMA （acetate）
Rivastigmine （tartrate） （100 mg）3-[（1S）-1-（dimethylamino）ethyl]phenyl ester N-ethyl-N-methyl-carbamic acid， 2R，3R-dihydroxybutanedioate； Exelon|SDZ-ENA 713； Rivastigmine （tartrate）
Dantrolene （sodium salt） （100 mg）1-[[[5-（4-nitrophenyl）-2-furanyl]methylene]amino]-2，4-imidazolidinedione， monosodium salt； F 44Dantrolene （sodium salt）
 N-（4-hydroxypentyl） metabolite-d5 （1 mg）（1-（4-hydroxypentyl）-1H-indol-3-yl）（2，2，3，3-tetramethylcyclopropyl）methanone-2，4，5，6，7-d5；  N-（4-hydroxypentyl） metabolite-d5
Darifenacin （hydrobromide） （50 mg）1-[2-（2，3-dihydro-5-benzofuranyl）ethyl]-α，α-diphenyl-3-pyrrolidineacetamide， monohydrobromide； UK 88525-04； Darifenacin （hydrobromide）
Z-VAD（OH）-FMK （500 ug）N-
LY2183240 2’-isomer （1 mg）5-（[1，1’-biphenyl]-4-ylmethyl）-N，N-dimethyl-2H-tetrazole-2-carboxamide； LY2183240 2’-isomer
25T2-NBOMe （hydrochloride） （10 mg）2-（2，5-dimethoxy-4-（methylthio）phenyl）-N-（2-methoxybenzyl）ethan-1-amine hydrochloride； 2C-T-NBOMe； 25T2-NBOMe （hydrochloride）
Dorzolamide （hydrochloride） （10 mg）（4S，6S）-4-（ethylamino）-5，6-dihydro-6-methyl-4H-thieno[2，3-b]thiopyran-2-sulfonamide 7，7-dioxide， monohydrochloride； L-671，152|MK 507； Dorzolamide （hydrochloride）
G-15 （25 mg）（3aS，4R，9bR）-4-（6-bromo-1，3-benzodioxol-5-yl）-3a，4，5，9b-tetrahydro-3H-cyclopenta[c]quinoline； G-15
Salubrinal （5 mg）（2E）-3-phenyl-N-[2，2，2-trichloro-1-[[（8-quinolinylamino）thioxomethyl]amino]ethyl]-2-propenamide； Salubrinal12-212DH10Bac 菌種1mL
Y1090 菌種1mL
糊精250g
熒光增白劑 281g
天然蛋白 A1mg
CAS70-18-8L- 谷胱甘肽 ( 還原型 )5g
130902-100酵母產(chǎn)孢培養(yǎng)基100mL
胰蛋白酶抑制劑100m
膠原酶Ⅳ型100mg
亮綠5g
WarmStart Bst DNA 聚合酶1600U
CAS98-92-0煙酰胺25g
130582-100小鼠 RFP 標簽單抗100μL
植物血球凝集素 M10mg
L- 酪氨酸25g
植酸100mL
單細胞全轉(zhuǎn)錄組擴增試劑盒 24 次
CAS61970-08-9交聯(lián)瓊脂糖凝膠 4B100mL
81203-5SDS-PAGE 電泳液 ( 干粉 )5L
柱式植物 RNAout 2.050 次
硫酸鐵100g