詳細(xì)介紹
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;BALB/3T3 clone A31*操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中,將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片,待細(xì)胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應(yīng)的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染:用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍(lán)。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側(cè),再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),以免產(chǎn)生氣泡,封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;BALB/3T3 clone A31*現(xiàn)貨直銷,免費快遞送貨上門。公司供應(yīng)各種細(xì)胞株,細(xì)胞系,種類齊全,現(xiàn)貨,質(zhì)量保證,公司所有產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于醫(yī)學(xué)診斷。使用前仔細(xì)閱讀本說明書。
產(chǎn)品名稱 | |
用途 | 僅用科研 |
保存條件 | 4℃保存一年;-20℃長期保存 |
細(xì)胞名稱
形態(tài)特性 成纖維細(xì)胞
生長特性 貼壁生長
特征特性 Contact-inhibited semi-normal cell line
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%
傳代方法 消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。
傳代情況 PN5
凍存條件 *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
運輸保存:
采用干冰保存運輸。收到細(xì)胞時,若干冰已經(jīng)*融化,請立即將細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng);若尚留有干冰,請立即將細(xì)胞放入液氮中保存待用,請按條件貯存細(xì)胞,切不可將細(xì)胞置于高溫環(huán)境。
保存條件:4℃保存一年;-20℃長期保存
用途:只可用于科研。
儲存:液氮。
運輸:干冰(第二代培養(yǎng)末期液氮凍存)。
細(xì)胞一般2-3天更換一次培養(yǎng)基,這取決于細(xì)胞生長的速度。許多細(xì)胞培養(yǎng)實驗室通常在周一,周三,周五更換培養(yǎng)基。
注意:*次植入后,在6-16小時內(nèi)更換培養(yǎng)基,以去除殘留的二甲基亞楓和死亡細(xì)胞。到達(dá)客戶手中,出現(xiàn)任何問題(人為或者非人為),導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。對于細(xì)胞的真實性,支持客戶檢測對應(yīng)的biomarker,(如證明細(xì)胞錯誤,全額退款。)公司針對每株細(xì)胞,鑒定gene background,鑒定完成的細(xì)胞可以提供數(shù)據(jù),用于證明細(xì)胞的真實性,并且?guī)椭蛻舾嗟牧私饧?xì)胞特性。
1’-Naphthoyl-2-methylindole (25 mg)(2-methyl-1H-indol-3-yl)-1-naphthalenyl-methanone; 1’-Naphthoyl-2-methylindole
Akt Inhibitor X (1 mg)2-chloro-N,N-diethyl-10H-phenoxazine-10-butanamine, monohydrochloride; Akt Inhibitor X
Meloxicam (100 mg)4-hydroxy-2-methyl-N-(5-methyl-2-thiazolyl)-1,1-dioxide-2H-1,2-benzothiazine-3-carboxamide; Coxicam|UH-AC 62XX; Meloxicam
Furin Inhibitor I (500 ug)N2-(1-oxodecyl)-L-arginyl-L-valyl-N-[(1S)-4-[(aminoiminomethyl)amino]-1-(2-chloroacetyl)butyl]-L-lysinamide; Decanoyl-Arg-Val-Lys-Arg-CMK; Furin Inhibitor I
PF-05274857 (hydrochloride) (10 mg)1-(4-(5’-chloro-3,5-dimethyl-[2,4’-bipyridin]-2’-yl)-piperazin)-3-(methylsulfonyl)-1-propanone, monohydrochloride; PF-05274857 (hydrochloride)
ADBICA N-pentanoic acid metabolite (5 mg)5-(3-((1-amino-3,3-dimethyl-1-oxobutan-2-yl)carbamoyl)-1H-indol-1-yl)pentanoic acid; ADBICA N-pentanoic acid metabolite
1,2-Distearoyl-sn-glycero-3-PC (250 mg)1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphatidylcholine; 1,2-DSPC|Coatsome MC 8080|1,2-Distearoyl-sn-glycero-3-Phosphocholine; 1,2-Distearoyl-sn-glycero-3-PC
Anatabine (tartrate) (50 mg)1,2,3,6-tetrahydro-2,3’-bipyridine 2,3-dihydroxysuccinate; Anatabine (tartrate)
ML-239 (5 mg)(2E)
ID-8 (25 mg)1-
tetranor-PGDM AChE Tracer (500 dtn)tetranor-PGDM AChE Tracer
22(R)-hydroxy Cholesterol (5 mg)cholest-5-ene-3β,22R-diol; Narthesterol; 22(R)-hydroxy Cholesterol
Pentadecanoyl Ethanolamide (100 mg)N-(2-hydroxyethyl)-pentadec*; Pentadecanoyl Ethanolamide
Cell-Based Assay Neutrophil Isolation Histopaque (25 ml)Cell-Based Assay Neutrophil Isolation Histopaque
4-hydroxy Nonenal-d3 (50 ug)(±)-4-hydroxy-9,9,9-d3-non-2E-enal; 4-HNE-d3; 4-hydroxy Nonenal-d3
Corilagin (5 mg)cyclic 3,6-[(1R)-4,4’,5,5’,6,6’-hexahydroxy[1,1’-biphenyl]-2,2’-dicarboxylate] 1-(3,4,5-trihydroxybenzoate)-β-D-glucopyranose磷酸二酯酶Ⅰ100U
GSH—PX 測試盒50 T
CAS9026-00-0膽固醇酯酶100U
131147-100山羊抗大鼠 IgG(H+L),堿性磷酸酶標(biāo)記100μL
3071-250血液 RNAout 250 次
木聚糖2.5g
4% 多聚甲醛250 mL
尿道上皮細(xì)胞生長因子5mL
BCIP-NBT 法地高雜交檢測試劑盒5次
21-0270-5 前列上皮細(xì)胞生長因子5mL
70607-100RNase-free Tris HCl,1M,pH 8.0100mL
PFG 固定液250 mL
BAY11-7082(NF-κB 抑制劑 )2mg
L-Arginine(NO 前體 )5g
亞硫修飾的 DNA100 次
23-0390-10Leptomycin B( 出核轉(zhuǎn)運抑制劑 )10μg
3672-50植物 DNAout50 次
Cre 重組酶50U
dNTP 溶液,100mM 0.5mL
0.5mLDNA 離心超濾管 (300-500 KD)1個
130596-200熒光染色細(xì)胞凋亡檢測試劑盒200 次
130514-2硅基磁珠2mL