小鼠胚胎成纖維細(xì)胞；Psi2 DAP說明書

小鼠胚胎成纖維細(xì)胞；Psi2 DAP說明書采用干冰保存運輸。收到細(xì)胞時，若干冰已經(jīng)*融化，請立即將細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng)；若尚留有干冰，請立即將細(xì)胞放入液氮中保存待用，請按條件貯存細(xì)胞，切不可將細(xì)胞置于高溫環(huán)境。

小鼠胚胎成纖維細(xì)胞；Psi2 DAP說明書現(xiàn)貨直銷，免費快遞送貨上門。公司供應(yīng)各種細(xì)胞株，細(xì)胞系，種類齊全，現(xiàn)貨，質(zhì)量保證，公司所有產(chǎn)品僅供科研使用，不得用于醫(yī)學(xué)診斷。使用前仔細(xì)閱讀本說明書。

產(chǎn)品名稱	小鼠胚胎成纖維細(xì)胞；Psi2 DAP說明書
用途	僅用科研
保存條件	4℃保存一年;-20℃長期保存

細(xì)胞名稱
形態(tài)特性  成纖維細(xì)胞
生長特性 貼壁生長
特征特性  這株細(xì)胞生成一種可以感染小鼠細(xì)胞的載體。 Psi2 DAP細(xì)胞生成的載體編碼了人類胎盤堿性磷酸酯酶基因和新霉素抗性基因。 這株細(xì)胞通過Psi2細(xì)胞插入一個重組的逆轉(zhuǎn)錄病毒(DAP)基因組衍生而來。 被這種Psi2 DAP產(chǎn)生的載體感染的細(xì)胞表達(dá)的磷酸酯酶可用組織化學(xué)方法檢測，可以用作體內(nèi)追蹤他們命運的標(biāo)記。 這些細(xì)胞也可能產(chǎn)生輔助病毒。 檢測輔助病毒的方法或其他逆轉(zhuǎn)錄病毒技術(shù)，請參考Cepko, C.L. Lineage analysis and immortalization of neura 
培養(yǎng)條件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%
傳代方法  消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。
傳代情況 PN5
凍存條件  *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR 
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 A類
運輸保存：
采用干冰保存運輸。收到細(xì)胞時，若干冰已經(jīng)*融化，請立即將細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng)；若尚留有干冰，請立即將細(xì)胞放入液氮中保存待用，請按條件貯存細(xì)胞，切不可將細(xì)胞置于高溫環(huán)境。
保存條件：4℃保存一年;-20℃長期保存
用途：只可用于科研。
儲存：液氮。
運輸：干冰(第二代培養(yǎng)末期液氮凍存)。
細(xì)胞一般2-3天更換一次培養(yǎng)基，這取決于細(xì)胞生長的速度。許多細(xì)胞培養(yǎng)實驗室通常在周一，周三，周五更換培養(yǎng)基。
注意：*次植入后，在6-16小時內(nèi)更換培養(yǎng)基，以去除殘留的二甲基亞楓和死亡細(xì)胞。到達(dá)客戶手中，出現(xiàn)任何問題（人為或者非人為），導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費再向客戶提供一次。對于細(xì)胞的真實性，支持客戶檢測對應(yīng)的biomarker，（如證明細(xì)胞錯誤，全額退款。）公司針對每株細(xì)胞，鑒定gene background，鑒定完成的細(xì)胞可以提供數(shù)據(jù)，用于證明細(xì)胞的真實性，并且?guī)椭蛻舾嗟牧私饧?xì)胞特性。
操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中，將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細(xì)胞爬片，待細(xì)胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍(lán)。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。Guanosine 5′-triphosphate （sodium salt hydrate） （10 mg）GTP；
Oenin （500 ug）Malvidin-3-O-glucoside|NSC 70532； 3-（β-D-glucopyranosyloxy）-5,7-dihydroxy-2-（4-hydroxy-3,5-dimethoxyphenyl）-1-benzopyrylium, monochloride
Procarbazine （hydrochloride） （50 mg）Indicarb|Matulane|NSC 77213|Natulan； N-（1-methylethyl）-4-[（2-methylhydrazinyl）methyl]-benzamide, monohydrochloride
LY411575 （1 mg）N-[（1S）-2-[[（7S）-6,7-dihydro-5-methyl-6-oxo-5H-dibenz[b,d]azepin-7-yl]amino]-1-methyl-2-oxoethyl]-3,5-difluoro-αS-hydroxy-benzeneacetamide
Calcein （1 g）Fluorescein Complexone|NSC 298193； N,N’-[（3’,6’-dihydroxy-3-oxospiro[isobenzofuran-1（3H）,9’-[9H]xanthene]-2’,7’-diyl）bis（methylene）]bis[N-（carboxymethyl）-glycine
Kobe 2602 （50 mg）2-
WZ4002 （5 mg）N-[3-[[5-chloro-2-[[2-methoxy-4-（4-methyl-1-piperazinyl）phenyl]amino]-4-pyrimidinyl]oxy]phenyl]-2-propenamide
Peracetylchitobiose （10 mg）Chitobiose octaacetate； 2-（acetylamino）-2-deoxy-4-O-[3,4,6-tri-O-acetyl-2-（acetylamino）-2-deoxy-β-D-glucopyranosyl]-D-glucopyranose-1,3,6-triacetate
LB 42708 （5 mg）[1-[[1-[（4-bromophenyl）methyl]-1H-imidazol-5-yl]methyl]-4-（1-naphthalenyl）-1H-pyrrol-3-yl]-4-morpholinyl-methanone
ErythromycinAk-Mycin|Eryc|NSC 55929|Staticin； erythromycin
cis,cis-Octadeca-9,12-dienol （250 mg）Linoleic alcohol|Linoleyl alcohol； 9Z,91103-100非凍型拭子病毒保存液100mL
免疫蛋白清除劑20 次
3-(3,4- 二羥基苯 )-L- 丙氨酸5g
間充質(zhì)干細(xì)胞生長因子 - 無血淸5mL
胃蛋白酶抑制劑溶液，1 mg/mL1mL
21-0170-5 角質(zhì)細(xì)胞生長因子5mL
100905-100RNase-free 鹽酸胍溶液 ,8M100mL
PCR 法 DNA 探針標(biāo)記試劑盒5次
氨基喋呤5mg
Genistein( 酪氨酸蛋白激酶抑制劑 )25mg
磁珠 2mL
D006-1常規(guī) DNA 測序服務(wù)1次
130559-10Rosetta-gami(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞0.1mL×10
小鼠抗 SUMO 標(biāo)簽蛋白單抗1000μL
甲醇500mL
三氯100g
10 μL RNase-free 白吸頭 ( 盒裝已滅菌帶芯長尖 )96 支
自誘導(dǎo)培養(yǎng)基 (lac 啟動子 )200mL
23-0230-100Doxorubicin(Adriamycin) 阿100μL