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小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;STO價(jià)格

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更新時(shí)間:2017-01-13 09:47:30瀏覽次數(shù):224

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;STO價(jià)格售后:收到細(xì)胞后7天,如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有質(zhì)量問(wèn)題(如污染,死亡,快遞運(yùn)輸?shù)仍颍r(shí),應(yīng)出具書(shū)面質(zhì)量問(wèn)題報(bào)告并及時(shí)傳真致銷售人員,我們將盡快為您解決。

詳細(xì)介紹

小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;STO價(jià)格質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購(gòu)買(mǎi)到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè),100%進(jìn)口來(lái)源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。

小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;STO價(jià)格操作步驟:

1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。

【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱
形態(tài)特性  成纖維細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性  STO是一株繼代生長(zhǎng)的胚成纖維細(xì)胞系,可用于制備飼養(yǎng)層細(xì)胞(feeder layers)和其他研究。 
培養(yǎng)條件  MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS
傳代方法  1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C4
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR 
同工酶 同工酶鑒定
染色體 
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。

5-TAMRA[5-羧基四甲基羅丹明] 單體5-TAMRA [5-Carboxytetramethylrhodamine] Single isomer
Tide Quencher 1氨基磷酸酯[TQ1氨基磷酸酯]Tide Quencher 1 phosphoramidite [TQ1 phosphoramidite]
EDANS標(biāo)記的Asp天冬氨酸FMOC-Asp(EDANS)-OH
酪蛋白,TAMRA標(biāo)記Casein, TAMRA-conjugated
ReadiUse 丙磺舒,鹽 水溶性ReadiUse probenecid, sodium salt Water-soluble
氯離子熒光探針光澤精 [N,N二甲基二吖啶硝酸鹽]lucigenin [Bis-N-methylacridinium nitrate]
iFluor 514琥珀酰SEiFluor 514 succinimidyl ester
ROS Brite 700 體內(nèi)成像優(yōu)化的ROS Brite 700 Optimized for in Vivo Imaging
iFluor 555 酰肼iFluor 555 hydrazide
Cyanine 5。5 單酸 [相當(dāng)于Cy5。5酸]Cyanine 5。5 mono acid [equivalent to Cy5。5 acid]
5-ROX, SE [5-羧基-X-羅丹明 琥珀酰亞胺酯]單體5-ROX, SE [5-Carboxy-X-rhodamine, succinimidyl ester] Single isomer
磺胺噻挫-KLH偶聯(lián)物[用于ELISA]Sulfathiazol-KLH Conjugate
GSK 4112 (25 mg)N-[(4-chlorophenyl)methyl]-N-[(5-nitro-2-thienyl)methyl]-1,1-dimethylethyl ester-glycine; GSK 4112
BIM5078 (50 mg)1-[(2-chloro-5-nitrophenyl)sulfonyl]-2-methyl-1H-benzimidazole; BIM5078
5-trans Prostaglandin D2 (100 mg)9。alpha。,15S-dihydroxy-11-oxo-prosta-5E,13E-dien-1-oic acid; 5,6-trans PGD2; 5-trans Prostaglandin D2
n E1 Alcohol (500 ug)1,11。alpha。,15S-trihydroxy-prost-13E-en-9-one; 1-hydroxy Prostaglandin E1|PGE1 Alcohol; Prostaglandin E1 Alcohol
Fucoxanthin (5 mg)6’R,7’-didehydro-5R,6-epoxy-4’,5’,6S,7-tetrahydro-3S,3’S,5’R-trihydroxy-β,β-caroten-8(5H)-one; α-Carotene; Fucoxanthin一步式 RT-PCR Mix 1mL
即用型 EMSA 試劑盒100 次
L- 丙氨酸25g
動(dòng)物種屬鑒定 PCR Mix 1100 次
CAS87-89-8肌醇100g
91204-50動(dòng)植物膜蛋白微量制備試劑盒50 次
油紅 O5g
菌種保存液10 管
L- 谷胱甘肽 ( 還原型 )5g
Zenker 固定液250 mL
CAS108-95-2重蒸酚250mL
131075-10糖蛋白染色試劑盒10 次
柱式 miRNA PAGE 膠回收試劑盒50 次
Lucigenin( 光澤精 )10mg
酸性磷酸酶1g
Caspase 6 檢測(cè)試劑盒 50 次
CAS72-19-5L- 蘇氨酸25g
81215B-20一站式 Western 印跡套裝 (AP 顯色法 )20 次
β- 環(huán)狀糊精5g
m7G(5´)ppp(5´)G 帽結(jié)構(gòu)類似物25 OD
L- 蘋(píng)果酸25g

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