詳細(xì)介紹
小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞;RAW 264.7 價(jià)格質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購(gòu)買到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè),100%進(jìn)口來(lái)源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞;RAW 264.7 價(jià)格操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 此細(xì)胞株源自BALB/c小鼠由Abelson鼠科白血病病毒誘導(dǎo)的腫瘤??僧a(chǎn)生溶菌酶;sIg-, Ia-,Thy-1.2-。為檢測(cè)到病毒顆粒的分泌,XC斑點(diǎn)形成試驗(yàn)陰性。該細(xì)胞可以胞飲中性紅并吞噬乳膠顆粒與酵母聚糖;可以經(jīng)抗體依賴分裂綿羊紅細(xì)胞與腫瘤靶細(xì)胞;LPS或PPD處理2天可誘導(dǎo)分裂紅細(xì)胞,但對(duì)腫瘤靶細(xì)胞無(wú)作用。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C150
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR STR鑒定
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
JWH 122 6-methylnaphthyl isomer (1 mg)(6-methylnaphthalen-1-yl)(1-pentyl-1H-indol-3-yl)methanone; JWH 122 6-methylnaphthyl isomer
Eutylone (hydrochloride) (10 mg)1-(1,3-benzodioxol-5-yl)-2-(ethylamino)-1-butanone, monohydrochloride; bk-EBDB|β-keto-Ethylbenzodioxolylbutanamine; Eutylone (hydrochloride)
2,5-DMA (25 mg)2,5-dimethoxy-α-methyl-benzeneethanamine; 2,5-Dimethoxyamphetamine; 2,5-DMA
Eicosapentaenoic Acid (50 mg)5Z,8Z,11Z,14Z,17Z-eicosapentaenoic acid; EPA|Timnodonic Acid; Eicosapentaenoic Acid
Olvanil (50 mg)N-[(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)methyl]-9Z-octadecenamide; N-Vanillyloleamide|NE 1955Olvanil
5(S),6(R),15(R)-Lipoxin A4 (100 ug)5(S),6(R),15(R)-trihydroxy-7E,9E,11Z,13E-eicosatetraenoic acid; 5(S),6(R),15(R)-LXA4|AT-Lipoxin A4|15-epi Lipoxin A4; 5(S),6(R),15(R)-Lipoxin A4
Biphenylindanone A (25 mg)3’-[[(2-cyclopentyl-2,3-dihydro-6,7-dimethyl-1-oxo-1H-inden-5-yl)oxy]methyl]-[1,1’-biphenyl]-4-carboxylic acid; BINA|MRLSD 23Biphenylindanone A
GSK-J4 (hydrochloride) (10 mg)ethyl 3-((6-(4,5-dihydro-1H-benzo[d]azepin-3(2H)-yl)-2-(pyridin-2-yl)pyrimidin-4-yl)amino)propanoate, monohydrochloride; GSK-J4 (hydrochloride)
Lopinavir (100 mg)N-[(1S,3S,4S)-4-[[2-(2,6-dimethylphenoxy)acetyl]amino]-3-hydroxy-5-phenyl-1-(phenylmethyl)pentyl]tetrahydro-αS-(1-methylethyl)-2-oxo-1(2H)-pyrimidineacetamide; A-157378。0|ABT-378|Aluviran|Koletra; Lopinavir
Dextromethorphan (hydrobromide hydrate) (500 mg)(9α,13α,14α)-3-methoxy-17-methyl-morphinan, hydrobromide monohydrate; DXM; Dextromethorphan (hydrobromide hydrate)山羊抗兔 IgG(Fc),堿性磷酸酶標(biāo)記100μL
CAS547-58-0甲基橙5g
130871-20一站式 MBP 標(biāo)簽蛋白純化套裝20 次
脂蛋白 PAGE 染液1套
昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液50mL
氯化鎂六水100g
AH109 酵母感受態(tài)細(xì)胞10×100μL
CAS632-69-9玫瑰紅鹽5g
131055-1TCEP 鹽酸膦1g
柱式細(xì)菌 DNAout50 次
磷酸肌酸二鹽10mg
植物血球凝集素 M10mg
PstI1000U
CAS8013-01-2酵母粉500g
140627-20細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒(Annexin V-PE)20 次
131127B-50脈沖電泳 Marker(Lambda LadderPFG)50 次
雙酶一管式 RT-PCR 試劑盒 (MMLV-Taq)50 次
動(dòng)物線粒體純化試劑盒 ( 精提 )15 次
淀粉樣 β- 蛋白片段 25-35250μg