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詳細(xì)介紹
小鼠雜交瘤細(xì)胞；HB BFR 87-124價(jià)格質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購(gòu)買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè)，100%進(jìn)口來(lái)源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
小鼠雜交瘤細(xì)胞；HB BFR 87-124價(jià)格操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。
【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 半貼壁生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞屬專利保藏，其特征特性尚未公開(kāi)。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代，3-4天傳1次
傳代情況 C6
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 未定
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
PIRH2 泛素連接酶抗體 規(guī)格:0.1ml
IGFR3/CD16 FC段γ受體3/免疫球蛋白G Fc段受體III抗體 規(guī)格:0.1ml
KDM5B/PLU1/Jarid1B 組蛋白去甲基化酶JARID1B抗體 規(guī)格:0.2ml
NRG3 神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白3抗體 規(guī)格:0.2ml
ABCA2 三磷酸腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗體 規(guī)格:0.2ml
PMCA1 細(xì)胞膜鈣ATP酶1抗體 規(guī)格:0.2ml
ORAV1 口腔高表達(dá)的蛋白1抗體 規(guī)格:0.2ml
IFI78/MX1 干擾素誘導(dǎo)蛋白P78抗體 規(guī)格:0.1ml
TULP2/CT65/Cancer testis antigen 65 瘤/睪抗原65 規(guī)格:0.2ml
PDCD7 凋亡相關(guān)蛋白7抗體 規(guī)格:0.2ml
CCDC51 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白51抗體 規(guī)格:0.2ml
EphA3/Eph receptor A3 酪氨酸蛋白激酶受體A3抗體 規(guī)格:0.2ml
ALDOB 醛酶2抗體 規(guī)格:0.1ml
SEN1/ 細(xì)胞衰老相關(guān)蛋白1抗體 規(guī)格:0.2ml
MDMX MDM2樣P53蛋白結(jié)合抗體 規(guī)格:0.2ml
HIST1H2AH 組蛋白H2A/S抗體 規(guī)格:0.2ml
RCL/c Myc responsive c-Myc應(yīng)答蛋白抗體 規(guī)格:0.2ml
N acetylglucosamine kinase N-乙酰氨基葡萄糖激酶抗體 規(guī)格:0.2ml
CKLFH5/CMTM5 趨化素樣因子超家族成員5抗體 規(guī)格:0.2ml谷胱甘肽 S 轉(zhuǎn)移酶 131061-1 1mg
50 次 柱式血液 DNAout
100g 硫酸銨
1g 纖維素酶
100 支 1000 μL RNase-free 藍(lán)吸頭 ( 盒裝 )
β －瓊脂糖酶 CAS37288-57-6 25U
PCNA 小鼠單抗 140592-100 100 μL
非凍型細(xì)菌 RNA 保存液 80601-100 100mL
30 次 免 RNA 提取 FFPE RT-PCR 試劑盒
250g 3- 異丁基 -1- 甲基黃嘌呤
5mL 間充質(zhì)干細(xì)胞軟骨細(xì)胞分化生長(zhǎng)因子
5mL PMSF 溶液，10mg/mL
間充質(zhì)干細(xì)胞脂防細(xì)胞分化生長(zhǎng)因子 21-0150-5 5mL
RNase-free EDTA 溶液 ,0.5M,pH 8.0 60308-100 100mL
1000 μL PCNA 小鼠單抗
50 次 DOP-PCR 試劑盒
50 次 DNA 電泳分子量標(biāo)準(zhǔn) (3)λDNA/BstE II
100mL YPDG 液體培養(yǎng)基
異硫氰酸熒光素 CAS3326-32-7 50mg
親和層析柱 140651-1 12 mL
50 次 真菌 RNAout
5g 鄰苯二胺
5g 2,5- 二苯基惡唑
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