詳細(xì)介紹
小鼠雜交瘤細(xì)胞;VEGF價(jià)格質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測(cè),100%進(jìn)口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
小鼠雜交瘤細(xì)胞;VEGF價(jià)格操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 半貼壁生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞屬專利保藏,其特征特性尚未公開。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 未定
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
免疫球蛋白E(IgE)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Immunoglobulin E (IgE)
脂聯(lián)素(ADP)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Adiponectin (ADP)
轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白(TTR)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Transthyretin (TTR)
誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(NOS2)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Nitric Oxide Synthase 2, Inducible (NOS2)
趨化因子C-X-C-基元受體4(CXCR4)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Chemokine C-X-C-Motif Receptor 4 (CXCR4)
雌激素受體α(ERα)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Estrogen Receptor Alpha (ERa)
阿黑皮素原(POMC)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Proopiomelanocortin (POMC)
白介素1受體關(guān)聯(lián)激酶4(IRAK4)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Interleukin 1 Receptor Associated Kinase 4 (IRAK4)
白介素17B(IL17B)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Interleukin 17B (IL17B)
組織蛋白酶S(CTSS)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Cathepsin S (CTSS)
骨形成蛋白8A(BMP8A)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Bone Morphogenetic Protein 8A (BMP8A)
心營(yíng)養(yǎng)素樣細(xì)胞因子1(CLCF1)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Cardiotrophin Like Cytokine Factor 1 (CLCF1)
丙酮酸脫氫酶激酶同工酶1(PDK1)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Pyruvate Dehydrogenase Kinase Isozyme 1 (PDK1)
大素受體1(CNR1)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Cannabinoid Receptor 1, Brain (CNR1)內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子 21-0220-5 5mL
RNase-free SDS 溶液 ,10% 60702-100 100mL
1套 PCR 優(yōu)化試劑盒
1個(gè) 暗盒 (8×10 英寸 )
1g HDAC 抑制劑
1.5mL DNA 堿性膠上樣液 ,6×
Ionomycin( 鈣離子載體 ) 23-0340-250 250nmol
凋亡 DNAout 130812-24 24 次
100mL RIPA 裂解液 ( 弱 )
100mg Congo Red
100U Pfu DNA 聚合酶
500U 人類單鏈選擇性單功能尿嘧啶 -DNA 糖基化酶
氯化鈣,二水 CAS10035-04-8 100g
一站式 TA 克隆試劑盒 90801A-20 20 次
30 次 一站式 miRNA 尿素 -PAGE 電泳套裝
10 次 克必隆 eTS 抑制性差減雜交 PCR 試劑盒
1g 膠原蛋白Ⅰ型
5mL 成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子 -2
100g DNA Guanidine HCl( 鹽酸胍 )
雙染細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒(Annexin V- 熒光素 488·PI) 140628-50 50 次
Southern DNA Marker(DIG) 120654B-20 20 次
30 次 石蠟包埋組織 RNAout