雜交瘤細(xì)胞；SU-211-10圖片

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雜交瘤細(xì)胞；SU-211-10圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱 雜交瘤細(xì)胞；SU-211-10圖片
形態(tài)特性  淋巴母細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 半貼壁生長(zhǎng)
特征特性  該細(xì)胞屬專利保藏，其特征特性尚未公開。 
培養(yǎng)條件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS
傳代方法  1:3傳代，3-4天傳1次
傳代情況 C6
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR 
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 未定
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測(cè)，100%進(jìn)口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。   細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

脂多糖結(jié)合蛋白(LBP)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Lipopolysaccharide Binding Protein (LBP)
半胱氨酸豐富分泌蛋白2(CRISP2)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Cysteine Rich Secretory Protein 2 (CRISP2)
肌微管素相關(guān)蛋白9(MTMR9)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Myotubularin Related Protein 9 (MTMR9)
核膜含血影蛋白重復(fù)蛋白1(Nesp1)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Nesprin 1 (Nesp1)
蛋白酶激活亞基3(PSME3)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Proteasome Activator Subunit 3 (PSME3)
復(fù)制啟動(dòng)因子1(REPIN1)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Replication Initiator 1 (REPIN1)
尿調(diào)蛋白(UMOD)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Uromodulin (UMOD)
受體活性修飾蛋白2(RAMP2)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Receptor Activity Modifying Protein 2 (RAMP2)
甲硫氨酰氨肽酶2(METAP2)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Methionyl Aminopeptidase 2 (METAP2)
亨廷頓蛋白(HTT)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Huntingtin (HTT)
D-氨基酸氧化酶(DAO)單克隆抗體Monoclonal Antibody to D-Amino Acid Oxidase (DAO)
苯胺素(ANLN)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Anillin (ANLN)
信號(hào)淋巴細(xì)胞激活分子家族成員7(SLAMF7)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Signaling Lymphocytic Activation Molecule Family, Member 7 (SLAMF7)
JNK1/MAPK8關(guān)聯(lián)膜蛋白(JKAMP)單克隆抗體Monoclonal Antibody to JNK1/MAPK8 Associated Membrane Protein (JKAMP)
Tolloid樣蛋白1(TLL1)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Tolloid Like Protein 1 (TLL1)
無翅型MMTV整合位點(diǎn)家族成員9B(WNT9B)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Wingless Type MMTV Integration Site Family, Member 9B (WNT9B)100 T    一氧化氮檢測(cè)試劑盒 ( 化學(xué)法 )    
2μg    克必隆 B 載體    
50g    葡聚糖    
500mL    IMDM 培養(yǎng)基 ( 含 1% 雙抗 )    
100mL    DNA  SDS 溶液，10%    
一站式生物素檢測(cè) TUNEL 試劑盒 (DAB 法 )    81026-10    10 次
DNA 電泳分子量標(biāo)準(zhǔn) (2)（300-5000 bp）    111108-50    50 次
25mg    生物素化的牛血清白蛋白    
25g    疊氮    
1Mu    青 G 鹽    
1mL    螢火蟲熒光素    
昆布多糖    CAS9008-22-4    100mg
抗凝血酶Ⅲ，10mg/mL    130534-1    1mL
50 次    柱式糞便 RNAout    
50μL    Mito-Tracker Green( 線粒體綠色熒光探針 )    
30 次    AMV cDNA *鏈合成試劑盒    
50μL    電泳 SYBR Green I    
0.1 mL×10    Stbl3 感受態(tài)細(xì)胞    
CpG 甲基轉(zhuǎn)移酶 (M.SssI)    120511-100    100U
超快核酸轉(zhuǎn)膜試劑盒    121110-5    5次
5次    TdT 加尾法 DNA 標(biāo)記試劑盒    
200mL    電泳丙烯酰胺溶液 ( 干粉型 )    
2500mL    TBE 電泳液 ,10×