詳細(xì)介紹
雜交瘤細(xì)胞;M13#14價格質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進(jìn)口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
雜交瘤細(xì)胞;M13#14價格操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣
生長特性 半貼壁生長
特征特性 該細(xì)胞屬專利保藏,其特征特性尚未公開。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況 C4
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 未定
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時,應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
人血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA kit
人胰激肽原酶(PK)ELISA Kit
人壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體1(TRAIL-R1)ELISA Kit
兔結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)ELISA Kit
兔子促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)ELISA Kit
豚鼠白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)ELISA Kit
小鼠α2纖溶酶抑制物(α2-PI)ELISA Kit
小鼠膽堿磷酸甘油酯(PC/CPG)ELISA Kit
小鼠角化細(xì)胞內(nèi)分泌因子(KAF)/雙調(diào)蛋白(AR)ELISA Kit
小鼠牛小腸堿磷酸酶(CIAP)ELISA Kit
小鼠細(xì)胞周期素D3(Cyclin-D3)ELISA Kit
小鼠脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA Kit
豬白介素12(IL-12/P40)ELISA Kit
豬纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISA Kit
D-甘露糖
N,N-雙(2-羥乙基)-3-氨基乙磺酸
碘硝基四唑紫嘌呤
酵母粉(Yeast Extract)
萘酚AS-TR磷酸鹽
羧甲基纖維素鈉鹽
異丙基-β-D-硫代半糖苷
Phosphotungstic acid hydrate(磷鎢酸)
Tris-蘋果酸緩沖液,pH5.2-8.6
Zenker固定液
TECTB 遺傳性耳聾β-tectorin抗體規(guī)格: 0.2ml
CPA2/Carboxypeptidase A2 羧肽酶A2抗體規(guī)格: 0.1ml
MMP24/ MMP25/MMP21 基質(zhì)金屬蛋白酶-24抗體規(guī)格: 0.1ml
G protein alpha Inhibitor 2 G蛋白α抑制蛋白2抗體規(guī)格: 0.2ml
AFP 甲胎蛋白抗體 0.1ml
MAG-a/L-MAG 髓鞘相關(guān)糖蛋白-a抗體規(guī)格: 0.1ml
FAM78B FAM78B蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml
human Serum IgA 人血清型免疫球蛋白A抗體 0.2ml
IRAK4 白介素-1受體相關(guān)激酶4抗體規(guī)格: 0.2ml
KF1/ZFP103 鋅指蛋白103抗體規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-rat IgG/Cy7 Cy7標(biāo)記的兔抗大鼠IgG規(guī)格: 0.1ml
PSGD/HOXB13 同源盒蛋白HOXB13抗體規(guī)格: 0.2ml
FBXO42 FBXO42蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-Goat IgM/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標(biāo)記的兔抗羊IgM規(guī)格: 0.1ml
glypican 3/GPC3 磷脂?;嫉鞍拙厶?3抗體規(guī)格: 0.1ml
phospho-GluR1(Ser849) 磷酸化谷氨酸受體1抗體規(guī)格: 0.1ml
Mouse Anti-Goat IgG/FITC FITC標(biāo)記的小鼠抗羊IgG規(guī)格: 0.3ml