詳細介紹
小鼠雜交瘤細胞株;4G1A6B4圖片【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 小鼠雜交瘤細胞株;4G1A6B4圖片
形態(tài)特性 淋巴母細胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性 該細胞屬專利保藏,其特征特性尚未公開。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 未定
細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應(yīng)將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
質(zhì)量保證:
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。 細胞到達客戶手中,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
Cytophaga (marine) medium
Desulfurella medium
Fusibacter paucivorans medium
Halopiger medium
LM medium
Methanobrevibacter curvatus medium
Middlebrook medium
Nevskia medium
Prey seawater broth
Rumen bacteria medium
Starch-mineral salt-agar (stms) + 15% NaCl
Thermodesulfobacterium hydrogeniphilum medium
Tris-YP medium
干粉型SOB培養(yǎng)基
大腸桿菌TB1菌種
AGS細胞株
COLO320/DM細胞株
HFSF細胞株
MC3T3-E1 [MC3T3E1]細胞株
OCM-1A [OCM1A]細胞株
SK-BR-3 [SKBR3]細胞株
丙二醛 測試盒/脂質(zhì)過氧化物測試盒
非凍型組織DNA保存液(100 mL)
細菌DNA提取
生物磁珠:氨基磁珠Mouse Anti-human IgG(3D3)/Cy5.5 Cy5.5標記的鼠抗人IgG單克隆抗體規(guī)格: 0.1ml
Integrin Alpha V + Beta 6 整合素αVβ6抗體規(guī)格: 0.2ml
SYNC/Syncoilin 微管卷曲蛋白SYNC抗體規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-Mink IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標記的兔抗水貂IgG規(guī)格: 0.1ml
IL-17B 白介素-17B抗體規(guī)格: 0.1ml
PSMD6/P44S10 蛋白酶調(diào)解因子6抗體規(guī)格: 0.2ml
Rabbit anti-mouse Kappa light chain/PE-Cy7 PE-Cy7標記的兔抗小鼠k鏈規(guī)格: 0.1ml
ICOS/CD278 誘導協(xié)同刺激分子CD278抗體規(guī)格: 0.2ml
RNF169 環(huán)指蛋白169抗體規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-Monkey IgG/Bio 生物素標記的兔抗猴IgG規(guī)格: 0.1ml
HMGB4 高遷移率族蛋白B4抗體規(guī)格: 0.1ml
RNF87 環(huán)指蛋白87規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-human IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標記的兔抗人IgG規(guī)格: 0.1ml
Hes5 發(fā)狀分裂相關(guān)增強子-5抗體規(guī)格: 0.2ml
HN1/ARM2 雄激素調(diào)節(jié)蛋白2抗體規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-Goat IgG/RBITC 羅丹明標記的兔抗羊IgG規(guī)格: 0.3ml
GYG1 糖原蛋白1抗體規(guī)格: 0.2ml
MEPE 細胞外基質(zhì)磷酸化抗體規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-Bovine IgM/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標記的兔抗牛IgM規(guī)格: 0.1ml
GlyR alpha 1/2/3 甘氨酸受體alpha 1/2/3型抗體規(guī)格: 0.1ml
TET1/CXXC6 Ten-eleven轉(zhuǎn)運基因1蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml
Mouse Anti-Bov IgG/PE-Cy3 PE-Cy3標記的小鼠抗牛IgG規(guī)格: 0.1ml
phospho-GATA1(ser310) 磷酸化珠蛋白轉(zhuǎn)錄因子1抗體規(guī)格: 0.1ml
BRD1 BRD1蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml