化工儀器網(wǎng)
詳細(xì)介紹
小鼠潘氏細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞株；GCLP圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱 小鼠潘氏細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞株；GCLP圖片
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性 該細(xì)胞屬專利保藏，其特征特性尚未公開。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代，3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 未定
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進(jìn)口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞英文名稱：PA317
A7r5(大鼠胸大動脈平滑肌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
蘇木素伊紅(HE)染色試劑盒規(guī)格：>200次
4-甲基傘形酮-β-D-半糖苷肉湯/MUGal肉湯/MUGal Broth用于多管發(fā)酵法快速檢測大腸菌群20克國產(chǎn)/進(jìn)口
人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞英文名稱：IMR-32
Orchimax培養(yǎng)基/Orchimax MediumBR10升國產(chǎn)/進(jìn)口
人急性淋巴母細(xì)胞白血病細(xì)胞英文名稱：MT-4
改良LETHEEN瓊脂基礎(chǔ)/LETHEEN Agar Base Modified化妝品中微生物檢測250克國產(chǎn)/進(jìn)口
黑化大家鼠肺成纖維樣細(xì)胞英文名稱：NRL2
HFF-1(人包成纖維細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
CDC厭氧菌瓊脂/CDC Anaerobic Agar用于厭氧菌的分離培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進(jìn)口
TF-1(人血液白血病細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
肝素抗凝管5毫升國產(chǎn)/進(jìn)口
非洲爪蟾胚胎細(xì)胞英文名稱：ACTE1
明膠培養(yǎng)基/Gelatin Medium細(xì)菌明膠液化試驗(yàn)250克國產(chǎn)/進(jìn)口
大鼠肝細(xì)胞瘤細(xì)胞英文名稱：H-4-II-E
無菌豬血清/Sterile Defidrinated Pig BloodBR100/400毫升國產(chǎn)/進(jìn)口
SV-HUC-1(人膀胱上永生化細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
RIN-m5f(大鼠胰島β細(xì)胞瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
PC-3M(人前列腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2gersion
SF-295(人XG惡性膠質(zhì)瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
MGC80-3(人胃細(xì)胞)5×106cells/瓶×2gersion
NCI-H1299(人非小細(xì)胞肺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2pKK223-3(pKK2333)
pLenti-N-tYFP(pLentiNtYFP)
pLS88
pLysE
pMCSG28 (linearized)
pMCSG73
pMON6851
pNirFP-N（pNirFPN）
pPAmCherry-Tubulin(pPAmCherryTubulin)(60908-5465)
pPGKNeo
pPZP100
pRANGER-BTB-3(pRANGERBTB3)
pRNATin-H1.2/Hygro(pRNATinH1.2Hygro)(60908-6001)
pSE640
pSIREN-RetroQ-TetP（pSIRENRetroQTetP）
pSUPER.retro.neo(pSUPERretroneo)（60908-6385）
pTALEN_v2 (NN)(pTALENv2NN)（60908-6475）
化工儀器網(wǎng)